ICS 71.100.70 Y 42 中华人民共和国国家标准 GB/T35800—2018 化妆品中防腐剂已胖定和氯已定及 其盐类的测定 高效液相色谱法 Determination of hexamidine, chlorhexidine and their salts as preservatives in cosmetics—High performance liquid chromatography 2018-09-01实施 2018-02-06发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 35800—2018 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257)归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所。 SA 本标准主要起草人：孟宪双、马强、白桦、张庆、肖海清、赵卫哲、孙雨婷、沈敏。 1 GB/T35800—2018 化妆品中防腐剂已定和氯已定及 其盐类的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了化妆品中防腐剂已胖定和氯已定及其盐类的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于水剂、膏霜、香波、散粉和唇膏类化妆品中防腐剂已胖定和氯已定及其盐类的测定。 本标准的检出限和定量限：已胖定和氯已定及其盐类的检出限为0.002%，定量限为0.004%。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 试样经溶剂提取、离心、微孔滤膜过滤后，用高效液相色谱测定，外标法定量，液相色谱-质谱确认。 4试剂和材料 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 乙睛：色谱纯。 4.1 4.2 甲醇：色谱纯。 4.3 四氢呋喃。 4.4 三氟乙酸。 4.5 氯化钠。 4.6 饱和氯化钠溶液：称取40g氯化钠（4.5），置于100mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，备用。 4.7 已定二（羟乙基磺酸）盐和氯已定的中文名称、英文名称、CAS号、分子式和相对分子质量参见 附录A中的表A.1,结构式参见附录A中的图A,1。 4.8已定和氯已定标准储备溶液（1000mg/L）：称取已定二（羟乙基磺酸）盐标准品（4.7)17.1mg （精确至0.1mg）至10mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度；称取氯已定标准品10.0mg（精确至 0.1mg）至10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，均于4℃避光保存，可使用3个月。 4.9已定和氯已定混合标准溶液：分别移取1mL已胖定和氯已定标准储备溶液（4.8）至10mL容 量瓶中，用甲醇（4.2）定容至刻度，根据需要用甲醇（4.2）稀释成适宜浓度的混合标准工作溶液，于4℃ 避光保存，可使用3个月。 5仪器和设备 5 5.1高效液相色谱仪（HPLC）：配有二极管阵列检测器。 1 GB/T35800—2018 5.2 2液相色谱-质谱/质谱（LC-MS/MS)仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.3超声波水浴。 5.4 离心机：转速不低于5000r/min。 5.5涡旋混合器。 5.6 分析天平：感量为0.0001g和0.001g。 5.7 具塞聚四氟乙烯离心管：50mL。 5.8 微孔滤膜：0.45um，材质为尼龙。 6 测定步骤 6.1 样品处理 6.1.1水剂、膏霜、香波和散粉类样品 称取0.5g（精确至0.001g）试样于50mL具塞聚四氟乙烯离心管（5.7)中，加入1mL饱和氯化钠 溶液（4.6），涡旋混合，再加入9mL水，涡旋混合后，以5000r/min离心10min，上清液转移至另 50mL具塞聚四氟乙烯离心管中。试样残渣继续加人10mL甲醇（4.2），在超声波水浴（5.3）中超声提 取20min，以5000r/min离心10min，合并上清液，经0.45μm微孔滤膜（5.8）过滤，供高效液相色谱 测定。 6.1.2唇膏类样品 称取0.5g（精确至0.001g）试样于50mL具塞聚四氟乙烯离心管（5.7)中，加入2mL四氢呋喃（4.3）， 涡旋混合，再加人8mL水，涡旋混合后，以5000r/min离心10min，上清液转移至另一50mL具塞聚四氟 乙烯离心管中。试样残渣继续加入10mL甲醇（4.2），在超声波水浴（5.3）中超声提取20min，以 5000r/min离心10min，合并上清液，经0.45μm微孔滤膜（5.8）过滤，供高效液相色谱测定。 6.2 测定条件 高效液相色谱测定条件如下： 色谱柱：XTerraMSCi8，5μm,250mmX4.6mm（内径）,或相当者； b) 流动相：见表1； c) 流速：1.0 mL/min; d) 柱温：30℃； e) 检测波长：260nm； f) 进样量：10μL。 表1流动相 步骤 时间/min 水（含0.1%三氟乙酸）/% 乙腈（含0.1%三氟乙酸）/% 0 0 70 30 1 5.0 2 98 2 9.0 2 98 3 9.1 70 30 12.0 70 30 2