ICS71.100.70 Y42 中华人民共和国国家标准 GB/T30939—2014 化妆品中污染物双酚A的测定 高效液相色谱-串联质谱法 DeterminationofthecontaminantbisphenolAincosmetics— Highperformanceliquidchromatograpy-tandemmassspectrometry 2014-07-08发布 2014-11-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。 本标准起草单位:北京市海淀区产品质量监督检验所、国家化妆品质量监督检验中心(北京)。 本标准主要起草人:王浩、杨红梅、郭启雷、刘艳琴、史海良、赵丽。 ⅠGB/T30939—2014 引 言 本标准中的被测物质是我国《化妆品卫生规范》规定的禁用物质,不得作为化妆品生产原料即组分 添加到化妆品中。如果技术上无法避免禁用物质带入化妆品时,则化妆品成品应符合《化妆品卫生规 范》对化妆品的一般要求,即在正常及合理的、可预见的使用条件下,不得对人体健康产生危害。 目前我国尚未规定这些物质的限量值,本标准的制定,仅对化妆品中此类物质的检测提供检测 方法。 ⅡGB/T30939—2014 化妆品中污染物双酚A的测定 高效液相色谱-串联质谱法 1 范围 本标准规定了化妆品中污染物双酚A的液相色谱-串联质谱测定方法。 本标准适用于膏霜、唇膏、水剂类等化妆品中双酚A的测定。 本方法检出限:0.025mg/kg,定量限:0.10mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 样品经碱性乙腈溶液或正己烷和二氯甲烷混合溶液超声提取,氨基固相小柱净化富集,用液相色 谱-串联质谱测定,外标法定量。 4 试剂和材料 除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 4.1 乙腈:色谱纯。 4.2 甲醇:色谱纯。 4.3 正己烷。 4.4 二氯甲烷。 4.5 氨水。 4.6 正己烷和二氯甲烷混合溶液(75+25,体积比):量取750mL正己烷(4.3)与250mL二氯甲烷 (4.4)混合。 4.7 甲醇和二氯甲烷混合溶液(20+80,体积比):量取200mL甲醇(4.2)与800mL二氯甲烷(4.4) 混合。 4.8 含1%氨水的甲醇溶液:移取5mL氨水(4.5)至500mL容量瓶中,甲醇(4.2)定容。 4.9 含1%氨水的乙腈溶液:移取5mL氨水(4.5)至500mL容量瓶中,乙腈(4.1)定容。 4.10 标准样品:双酚A标准样品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1,纯 度不小于99%,结构式为: 1GB/T30939—2014 表1 双酚A标准样品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量 中文名称 英文名称 CAS登录号 分子式 相对分子质量 双酚A BisphenolA 80-05-7 C15H16O2 228.29 4.11 标准溶液 4.11.1 标准储备液:分别准确称取0.01g标准样品(4.10),精确至0.0001g,用甲醇配成0.1mg/mL 的标准储备液,该溶液在-18℃以下保存。 4.11.2 中间浓度标准溶液:1.0μg/mL。准确吸取1mL标准储备液(4.11.1)于100mL容量瓶中,用 甲醇溶液稀释至刻度,该溶液在4℃以下保存。 4.11.3 基质混合标准工作溶液:根据仪器的灵敏度和线性范围,吸取一定量的中间浓度标准溶液 (4.11.2),用空白样品提取液配成系列浓度的基质混合标准工作溶液。当天配制。 4.12 氨基固相萃取小柱:3mL,200mg或性能相当者。 4.13 滤膜:0.22μm,有机相。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱-串联质谱仪:配有电喷雾离子源。 5.2 分析天平:感量分别为0.0001g和0.001g。 5.3 超声清洗器。 5.4 旋转蒸发仪。 5.5 具塞比色管:10mL和25mL。 6 分析步骤 6.1 样品制备 6.1.1 膏霜等不含蜡质的样品 称取0.5g样品,精确至0.001g,置于25mL比色管中,用含1%氨水的乙腈溶液(4.9)定容至刻 度,超声波提取20min,经滤纸过滤,吸取15mL滤液至100mL蒸发瓶内,于45℃水浴中减压蒸馏至 干,用10mL正己烷和二氯甲烷混合溶液(4.6)溶解,将溶液以1mL/min左右的流速通过固相萃取柱 (4.12),待溶液完全流出后,再用10mL正己烷和二氯甲烷混合溶液(4.6)冲洗蒸发瓶并过柱,重复两 次,最后用15mL甲醇和二氯甲烷混合溶液(4.7)洗脱萃取柱,收集洗脱液至蒸发瓶内,45℃减压旋转 蒸发至干,再准确加入3mL含1%氨水的甲醇溶液(4.8),混合摇匀,经0.22μm滤膜(4.13)过滤,滤液 供液相色谱-串联质谱分析。 6.1.2 唇膏等含蜡质的样品 称取0.5g样品,精确至0.001g,置于25mL比色管中,用正己烷和二氯甲烷混合溶液(4.6)定容至 刻度,超声波提取20min,经滤纸过滤,吸取15mL滤液至50mL烧杯中,将溶液以1mL/min左右的 流速通过固相萃取柱(4.12),待溶液完全流出后,再用10mL正己烷和二氯甲烷混合溶液(4.6)冲洗烧 杯并过柱,最后用15mL甲醇和二氯甲烷混合溶液(4.7)洗脱萃取柱,收集洗脱液至蒸发瓶内,45℃减 压旋转蒸发至干,再准确加入3mL含1%氨水的甲醇溶液(4.8),混合摇匀,经0.22μm滤膜(4.13)过 滤,滤液供液相色谱-串联质谱分析。 2GB/T30939—2014 6.1.3 润肤水等水剂类样品 称取1.0g样品,精确至0.001g,置于10mL比色管中,用含1%氨水的乙腈溶液(4.9)定容至刻 度,超声波提取10min,经滤纸过滤,经0.22μm滤膜(4.13)过滤,滤液供液相色谱-串联质谱分析。 6.2 测定 6.2.1 液相色谱条件 液相色谱参考条件如下: a) 色谱柱:MGⅢ-C18柱,1.8μm,150mm×2.1mm(i.d.),或性能相当者; b) 柱温:25℃; c) 进样量:5μL; d) 流动相:甲醇+水,洗脱梯度见表2。 表2 分离双酚A的洗脱梯度 时间/min 甲醇/% 水/% 0 65 35 7 65 35 7.1 100 0 10 100 0 10.1 65 35 16 65 35 e) 流动相流速:0.25mL/min。 6.2.2 质谱条件 质谱参考条件如下: a) 离子源:电喷雾离子源(ESI); b) 扫描方式:负离子扫描; c) 监测方式:多反应监测(MRM); d) 干燥气温度:340℃; e) 干燥气流速:8L/min; f) 雾化器压力;35psi(241.4kPa); g) 毛细管电压:4000V; h) 定性离子对、定量离子对及碰撞能量见表3。 表3 双酚A的定性离子对、定量离子、碎裂电压和碰撞能量 被测物质名称 定量离子 定性离子 碎裂电压/V 碰撞能量/V 双酚A 227.0/212.1227.0/212.1 227.0/132.9120 17;30 6.2.3 定量分析 在仪器最佳工作条件下,对基质混合标准工作溶液(4.11.3)进样,以峰面积为纵坐标,混合标准工 3GB/T30939—2014 作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线,用标准工作曲线对样品进行定量,样品溶液中待测物的响应值 均应在仪器测定的线性范围内。外标法定量。 6.3 定性确证 被测组分选择一个母离子,2个以上子离子,在相同实验条件下,样品中待测物质的保留时间与标 准溶液中对应的保留时间偏差在±2.5%之内;且样品中被测组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标 准溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较,偏差不超过表4规定的范围,则可判定为样品中存在对 应的待测物。 双酚A标准样品总离子流图参见附录A。 表4 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的最大偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 6.4 空白试验 除不称取样品外,均按上述测定条件和步骤进行。 7 结果计算 样品中双酚A含量按式(1)计算: X=c×V×k m…………………………(1) 式中: X———样品中双酚A的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); c———样品测定液中双酚A含量的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL); V———样品定容体积,单位为毫升(mL); k———乘积因子,对于水剂类化妆品,k=1;对于膏霜、唇膏类化妆品,k=0.2; m———样品的质量,单位为克(g)。 计算结果应扣除空白值,计算结果保留至小数点后三位。 8 检出限和定量限 本方法检出限为0.025mg/kg,定量限为0.10mg/kg。 9 回收率与精密度 在添加浓度0.1mg/kg~10.0mg/kg范围内,回收率在87.1%~101.1%之间,相对标准偏差小 于10%。 10 允许差 在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 4GB/T30939—2014 附 录 A (资料性附录) 标准样品总离子流图 图A.1 双酚A标