ICS65.150 B51 中华人民共和国国家标准 GB/T26619—2011 斑 节 对 虾 Gianttigerprawn 2011-06-16发布 2011-11-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布前 言 本标准的附录C为规范性附录,附录A、附录B为资料性附录。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口。 本标准起草单位:中国水产科学研究院黄海水产研究所、中国海洋大学。 本标准主要起草人:张岩、于函、肖永双、张华。 ⅠGB/T26619—2011 斑 节 对 虾 1 范围 本标准规定了斑节对虾(Penaeusmonodon)的主要形态特征、生长与繁殖特性、遗传学特性以及检 测方法。 本标准适用于斑节对虾种质的检测和鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 GB/T18654.12 养殖鱼类种质检验 第12部分:染色体组型分析 GB/T19782 中国对虾 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 体长 bodylength 眼柄基部或额角基部眼眶缘到尾节末端的长度。 3.2 头胸甲长 carapacelength 眼窝后缘连线中央到头胸甲中线后缘的长度。 4 名称与分类 4.1 学名 斑节对虾PenaeusmondonFabricius,1798。 4.2 分类位置 节肢动物门(Arthropoda),甲壳纲(Crustacea),十足目(Decapoda),对虾科(Penaeidae),对虾属 (Penaeus)。 5 形态特征 5.1 外形 体表光滑,壳稍厚,体色由暗绿色、深棕色和浅黄色横斑相间排列,构成腹部鲜艳斑纹。腹部游泳足 浅蓝色,原肢前面黄色,其缘毛桃红色,第2、3颚足外肢刚毛桃红色。斑节对虾的外部形态见图1。 图1 斑节对虾外部形态 1GB/T26619—2011 额角较平直,末端较粗,稍向上弯,伸至第1触角柄末端,上缘具7齿~8齿,胃上刺与第1齿距离 较大,约为第2齿至第3齿距离的2倍;额角后脊伸至头胸甲后缘附近。额角侧脊较低而钝,伸至胃上 刺下方。头胸甲具眼眶触角沟、颈沟。额角侧沟较深,伸至胃上刺下方。额角后脊中央沟明显,但较浅 而窄,断续后伸。无额胃沟。肝脊较宽而钝,前半水平伸,后部稍低。眼胃脊约占头胸甲眼眶缘与肝刺 间距离的后部2/5。头胸甲具触角刺、肝刺、胃上刺。眼眶角圆形。前侧角圆无颊刺;腹部第4节中部 至第6节背中央具纵脊。第6节长为高的1.1倍。尾节稍长于第6节,末端尖,无侧缘刺。对虾头胸甲 分区情况参见附录A。 第1触角柄刺伸至第1节中部,外缘末端刺较小,内侧附肢伸至柄第1节末或稍超出,第1触角鞭 较短,下鞭约为头胸甲的2/3,上鞭梢短于下鞭,上鞭基部较粗部分约占鞭长的1/3。第2触角鳞片超出 第1触角柄末端。第3额足伸至第1触角柄第3节末端(成体雄性),雌性及幼雄性伸至柄第1节末端, 雄性指节几乎与掌节等长,接于掌的近末端1/5处,掌末有丛毛。雌性者指为掌长的1/2~1/3。 第1步足伸至或稍超出第2触角柄腕末端。第3步足最长,伸至第1触角柄末,或以指节超出之。 第5步足伸至第2触角柄第1节中部。第1步足有基节刺和座节刺,第2步足仅有基节刺。第1步足 至第4步足具外肢,第5步足无外肢(对虾外形、体节、附肢情况参见附录A)。 5.2 雄性交接器 背中叶末端突小,半圆形,侧叶较宽,顶端较圆;明显地超出中叶之外,末部有雏形小齿。斑节对虾 雄性交接器见图2。 图2 斑节对虾雄性交接器 5.3 雄性附肢 略呈梯形,长为最大宽的近2倍,末半部较窄,基部较宽,边缘着生硬刺。斑节对虾雄性附肢见图3。 图3 斑节对虾雄性附肢 2GB/T26619—2011 5.4 雌性交接器 第4步足间有一粗大的钙化隆起,边缘密生较长的刚毛,形似花冠,后有1端突与纳精囊前中央纵 裂口相接。纳精囊盘状,宽大于长,约为长的1.2倍,中央纵行的开口边缘厚大成唇。斑节对虾雌性交 接器见图4。 图4 斑节对虾雌性交接器 5.5 可量性状 5.5.1 第1触鞭较长,约为头胸甲长的2/3。 5.5.2 眼胃脊约占头胸甲眼眶缘与肝刺间距离的后部2/5。 5.5.3 第6节长为高的1.1倍。 5.5.4 尾节稍长于第6节。 5.5.5 第1触角鞭下鞭约为头胸甲的2/3,上鞭基部较粗部分约占鞭长的1/3。 5.6 可数性状 额角齿式7~8/2~3,以7/3者较多。 6 生长与繁殖 6.1 寿命 在天然水域中雄虾寿命一般为1年~1.5年,雌虾寿命大约2年。 6.2 体长体重关系 斑节对虾南海西北部水域野生群体的体长与体重关系见式(1)、式(2): 雌虾:W=1.1274×10-5L3.0411 (r=0.9953,n=52)………………(1) 雄虾:W=7.6366×10-6L3.1151 (r=0.9815,n=48)………………(2) 式中: W———体重,单位为克(g); L———体长,单位为毫米(mm)。 不同日龄养殖斑节对虾的体长、体重实测值参见附录B。 6.3 繁殖 6.3.1 生物学最小型 斑节对虾第1次性成熟的最小个体体长为189mm,最小体重95g。 6.3.2 产卵 斑节对虾的繁殖期较长,7月至第二年2月均为繁殖产卵期。卵子分批发育成熟,分次产出。 3GB/T26619—2011 6.3.3 繁殖力 斑节对虾的怀卵量因个体大小而异,为109×104粒/尾~211.8×104粒/尾,平均154×104粒,产 卵量30×104粒~100×104粒。 6.3.4 卵子特征 斑节对虾卵呈球形,黄绿色,稍透明,卵径0.27mm~0.31mm,平均0.29mm。在静止水中,卵慢 慢下沉池底。卵裂的方式为全均等分裂。 7 细胞遗传学特性 斑节对虾的染色体数目为2n=88。 8 生化遗传学特性 8.1 同工酶酶谱 斑节对虾成体肌肉中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的电泳图谱见图5,表现为一条酶带。 图5 斑节对虾成体肌肉中LDH同工酶电泳图谱 8.2 群体遗传变异范围 斑节对虾三亚种群和纳颉岛种群的平均杂合度分别是0.3596和0.3254,厦门养殖群体的多态位 点比例P为61.96%,预期杂合度He为0.151,观察杂合度Ho为0.120。 9 检测方法 9.1 形态特征 长度测量用直尺,精确到1mm。 9.2 生长 长度测量用直尺,精确到1mm,重量(湿重)采用吸水纸吸去体表水分后再用托盘扭力天平称重,精确到 0.1g,所得到的数据用Excel进行统计与回归分析,体重与体长的关系应用W=aLb模型进行拟合。 9.3 繁殖力测定 用天平或杆秤称产卵前、后雌性亲虾的重量,前后两次称重之差即为产卵的重量。用电子天平称刚 产出的卵1.0g左右,在解剖镜下计数,平行两次,平均值为卵密度(粒/g)。产卵量按式(3)计算: G=(W1-W2)(n1/2w样1+n2/2w样2)…………………………(3) 式中: G———产卵量,单位为粒; W1———产卵前亲虾重量,单位为克(g); W2———产卵后亲虾重量,单位为克(g); n1———试样1的卵粒数,单位为粒; w样1———试样1重量,单位为克(g); n2———试样2的卵粒数,单位为粒; w样2———试样1重量,单位为克(g)。 9.4 细胞遗传学特性 取雄性斑节对虾,在其腹部1、2节间侧注射秋水仙素溶液(浓度按1.5μg/g体重),注射完毕后在 水族箱中暂养4h~6h,取出解剖,获取其精巢,用0.7%氯化钾(KCl)低渗,卡诺氏(Carony’s)液固定, 4GB/T26619—2011 气干法制片,吉姆萨(Gimsa)染色,镜检,选择分散良好的染色体计数。计数方法按GB/T18654.12的 规定执行。 9.5 生化遗传学特性 取肌肉组织加入5倍体积的0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)(配制方法见附录C)冰浴匀浆, 14000r/min下,4℃离心15min,取上清液与甘油-溴酚蓝加样缓冲液(配制方法见附录C)混合,立即 电泳或-20℃保存,24h内200V电泳12h,采用TG缓冲系统,缓冲液的配制见附录C。电泳采用垂 直板聚丙烯酰胺凝胶电泳,分离胶和浓缩胶的浓度分别为7.5%和2.5%,染色液的配制按GB/T19782 的规定执行。 群体遗传学特征中,三亚种群和纳颉岛群体的数据是对30尾样品的肌肉和肝胰腺两种组织中的苹 果酸酶(ME)、苹果酸脱氢酶(MDH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸葡萄糖变位酶 (PGM)、碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)和酯酶(EST)9种同工酶的检 测结果。厦门养殖群体的数据是对40尾样品的肌肉和肝胰腺两种组织中的酯酶(EST)、酸性磷酸酶 (ACP)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(ME)、乙醇脱氢酶 (ADH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷氨酸脱氢酶(GDH)9种同工酶的检测结果。多态位点比例(P)、 平均杂合度观察值(Ho)、预期杂合度(He)分别按式(4)、式(5)、式(6)计算: P=N1/n×100% …………………………(4) 式中: P———多态位点比例; N1———多态位点数; n———