GB GB GB GB 2 6 4 0 5 - 2 0 1 1 食品安全国家标准 食品添加剂 叶黄素 2 0 1 1 - 0 3 - 1 5 发布 2 0 1 1 - 0 5 - 1 5 实施 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部 发 布 1 食品安全国家标准 食品添加剂 叶黄素 1 范 围 本 标 准 适 用 于 以 万 寿 菊 （ T a g e t e s e r e c t a L . ） 油 树 脂 为 原 料 ， 经 皂 化 、 提 取 精 制 而 成 的 食 品 添 加 剂 叶黄 素。 商品 化的 叶黄 素产 品可 含有 用于 标准 化等 目的 的食 用植 物油 、糊 精、 抗氧 化剂 等辅 料。 2 分 子式 、结 构式 和相 对分 子质 量 2 . 1 分 子式 C 4 0 H 5 6 O 2 2 . 2 结 构式 2 . 3 相 对分 子质 量 5 6 8 . 8 8 （ 按 2 0 0 7 年 国际 相对 原子 质量 ） 3 技 术要 求 3 . 1 感 官要 求： 应符 合表 1 的 规定 。 表 1 感 官要 求 项 目 要 求 检验方法 色泽 桔黄色至桔红色 取 适 量 样 品 置 于 清 洁 、 干 燥 的 白 瓷 盘 中 ， 在 自 然 光线下，观察其色泽和状态。 组织状态 粉末 3 . 2 理 化指 标： 应符 合表 2 的 规定 。 表 2 理 化指 标 项 目 指 标 检验方法 总类胡萝卜素 ， w / % ≥ 8 0 . 0 附录 A 中 A . 3 叶黄素 ， w / % ≥ 7 0 . 0 附录 A 中 A . 4 玉米黄质 ， w / % ≤ 9 . 0 附录 A 中 A . 4 干燥减量 ， w / % ≤ 1 . 0 G B 5 0 0 9 . 3 减压干燥法 灰分 ， w / % ≤ 1 . 0 G B 5 0 0 9 . 4 正己烷 / （ m g / k g ） ≤ 5 0 附录 A 中 A . 5 铅（ P b ） / （ m g / k g ） ≤ 3 G B 5 0 0 9 . 1 2 总砷（以 A s 计） / （ m g / k g ） ≤ 3 G B/ T 5 0 0 9 . 1 1 2 附 录 A 检 验方 法 A . 1 一 般规 定 本 标准 所用 试剂 和水 ， 在 没有 注明 其他 要求 时 ， 均 指分 析纯 试剂 和 G B/ T 6 6 8 2 — 2 0 0 8 中 规定 的三 级 水。 试验 中所 用标 准滴 定溶 液、 杂质 测定 用标 准溶 液、 制剂 及制 品， 在没 有注 明其 他要 求时 ，均 按 G B/ T 6 0 1 、 G B/ T 6 0 2 、 G B/ T 6 0 3 的 规定 制备 。 试 验中所 用溶 液在 未注 明用 何种 溶剂 配制 时， 均指 水 溶液 。 A . 2 鉴 别试 验 A . 2 . 1 不 溶于 水， 极微 溶于 正己 烷， 溶于 乙醇 和氯 仿。 A . 2 . 2 在 测定 总类 胡萝 卜素 含量 试验 中， 试样 液 在 4 4 6 n m 附 近有 最大 吸收 。 A . 2 . 3 在 测定 叶黄 素含 量试 验中 ， 试 样液 在液 相色 谱图 中的 主峰 保留 时间 应与 标准 溶液 中叶 黄素 的 保 留时 间相 同。 A . 3 总 类胡 萝卜 素的 测定 A . 3 . 1 试 剂和 材料 A . 3 . 1 . 1 溶 剂： 正己 烷、 丙酮 、甲 苯和 无水 乙醇 的混 合物 (1 0 ∶ 7 ∶ 7 ∶ 6 ) 。 A . 3 . 1 . 2 无 水乙 醇。 A . 3 . 2 仪 器和 设备 紫 外 - 可 见分 光光 度计 。 A . 3 . 3 分 析步 骤 准 确称 取 0 . 0 3 g 试 样 ， 精 确 至 0 . 0 0 0 1 g ， 用 A . 3 . 1 . 1 溶 剂溶 解 ， 转 移至 1 0 0 m L 容 量瓶 中 ， 加 A . 3 . 1 . 1 溶 剂定 容至 刻 度， 摇 匀。 取 此试 样液 1 m L 于 1 0 0 m L 容 量瓶 中 ， 使 用无 水乙 醇定 容至 刻度 ， 置 于 1 c m 比 色 皿 中 ， 以 无 水 乙 醇 做 空 白 对 照 ， 用 紫 外 - 可 见 分 光 光 度 计 在 4 4 6 n m ± 1 n m 处 的 最 大 吸 收 波 长 处 测 定吸 光度 。 （ 吸光 度应 控制 在 0 . 3 ~ 0 . 7 之 间， 否则 应调 整试 样液 浓度 ，再 重新 测定 吸光 度 。 ） A . 3 . 4 结 果计 算 总 类胡 萝卜 素含 量以 总类 胡萝 卜素 的质 量分 数 w 0 计 ，数 值以 % 表 示，按 公式 （ A . 1 ） 计算 ： 2550 1 0 × = c A w ………………………… （ A .1 ） 式 中： A — —实 际测 定试 样液 的吸 光度 ； c — —被 测试 样液 的浓 度的 数值 ，单 位为 克每 毫 升（ g / m L ） ； 2 5 5 0 — — 1 % 试 样液 在 无水 乙醇 中波 长 4 4 6 n m 处 的吸 收系 数。 实 验 结 果 以 平 行 测 定 结 果 的 算 术 平 均 值 为 准 。 在 重 复 性 条 件 下 获 得 的 两 次 独 立 测 定 结 果 的 绝 对 差 值不大 于算 术平 均值 的 1 . 5 % ， 计算 结果 保留 小数 点后 一位 有效 数字 。 A . 4 叶 黄素 和玉 米黄 质的 测定 A . 4 . 1 试 剂和 材料 A . 4 . 1 . 1 正 己烷 ：色 谱纯 。 A . 4 . 1 . 2 乙 酸乙 酯： 色谱 纯。 A . 4 . 1 . 3 叶 黄素 标准 品： 已知 纯度 。 3 A . 4 . 1 . 4 玉 米黄 质标 准品 ：已 知纯 度。 A . 4 . 2 仪 器和 设备 高效 液相 色谱 仪（ 检测 器波 长 为 4 4 6 n m ） 。 A . 4 . 3 参 考色 谱条 件 A . 4 . 3 . 1 色 谱柱 ： 硅 胶柱 ， 4 . 6 m m × 2 5 0 m m ， 粒度 3 µ m ； 或其 他等 效的 色谱 柱 。 A . 4 . 3 . 2 流 动相： 按 正己 烷 ∶ 乙 酸乙 酯 = 7 0 ∶ 3 0 （体 积比 ） 配 制， 混 合均 匀后 ， 用 0 . 4 5 μ m 滤 膜过 滤 ， 超 声脱气 后备 用。 A . 4 . 3 . 3 柱 温：室 温。 A . 4 . 3 . 4 流 动相 流速 : 1 . 5 m L / m i n 。 A . 4 . 3 . 5 进 样量 ： 1 0 μ L 。 A . 4 . 4 分 析步 骤 A . 4 . 4 . 1 标 准溶 液的 制备 分 别称 取约 0 . 0 1 g 叶 黄素 和玉 米黄 质标 准品 ，精 确至 0 . 0 0 0 1 g ， 用 流动 相溶 解 ， 移入 一个 5 0 m L 容 量瓶 中， 加 流 动相 定容 至刻 度， 摇 匀备 用。 A . 4 . 4 . 2 试 样液 的制 备 称 取 0 . 0 2 5 g ~ 0 . 0 2 7 g 试 样， 精 确至 0 . 0 0 0 1 g ， 用 流动 相溶 解 ， 移 入一 个 1 0 0 m L 容 量瓶 中 ， 加流 动 相 定容 至刻 度， 摇 匀备 用。 A . 4 . 4 . 3 测 定 在 A . 4 . 3 参 考色 谱条 件下 ， 对 叶黄 素和 玉米 黄质 的标 准溶 液进 行测 定 ， 记 录色 谱图 。 要 求以 叶黄 素 峰计 ，理 论板 数至 少为 5 0 0 0 ， 主峰 与异 构体 峰的 分离 度至 少为 1 . 5 。 在 A . 4 . 3 参 考 色 谱条 件下 ， 对 试样 液进 行测 定 ， 根 据标 准品 的保 留时 间定 性 ， 记 录色 谱图 。 重 复 实 验两次 ，分 别得 到叶 黄素 和玉 米黄 质的 平均 峰面 积值 。 A . 4 . 5 结 果计 算 叶 黄素 含量 以叶 黄素 的质 量分 数 w 1 计 ，数 值以 % 表 示，按 公 式（ A . 2 ）计 算： 1 0 1 P w w × = … …… …… …… …… …… …… … （ A . 2 ） 玉 米黄 质含 量以 玉米 黄质 的质 量分 数 w 2 计 ，数 值以 % 表 示，按 公 式（ A . 3 ）计 算： 2 0 2 P w w × = … …… …… …… …… …… …… … （ A . 3 ） 式 中： w 0 — — 按 照本 标准 A . 3 测 定的 总 类胡 萝卜 素的 质量 分数 ， 数 值以 % 表 示； P 1 — —叶 黄素 的峰 面积 百分 比； P 2 — —玉 米黄 质的 峰面 积百 分比 。 实 验 结 果 以 平 行 测 定 结 果 的 算 术 平 均 值 为 准 。 在 重 复 性 条 件 下 获 得 的 两 次 独 立 测 定 结 果 的 绝 对 差 值不 大于 算术 平均 值的 2 % ， 计算 结果 保留 小数 点后 一位 有效 数字 。 A . 5 正 己烷 的测 定 A . 5 . 1 仪 器和 设备 气 相色 谱仪 ， 带氢 火焰 离子 检 测器（ F ID ） 和顶 空进 样器