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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210617338.6 (22)申请日 2022.06.01 (71)申请人 华南农业大 学 地址 510642 广东省广州市天河区五山路 483号 (72)发明人 张细权 闲明健 (74)专利代理 机构 广州粤高专利商标代理有限 公司 44102 专利代理师 赵崇杨 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种选育屠体性状好的鸡个 体的方法 (57)摘要 本发明公开了一种选育屠体性状好的鸡个 体的方法。 本发明从鸡核糖体蛋白大亚基3 ‑like 基因(RPL3L)中发现了与鸡屠体性状相关的 InDel标记, 并提供了检测所述InDel标记的引物 和试剂盒, 可利用本发明所述InDel标记、 所述 InDel标记的检测引物或检测试剂盒进行鸡屠体 性状的分子标记辅助选育, 具有成本低廉、 准确 性高的优点。 在此基础上, 本发明还提供了一种 选育屠体性状好的鸡个体的方法。 本发明不仅为 鸡屠体性状的选育提供了新的分子标记和选育 屠体性状好的鸡个体的方法, 也推进了我国鸡遗 传育种工作的发展。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图1页 CN 114959061 A 2022.08.30 CN 114959061 A 1.一种与鸡屠体性状相关的InDel标记, 其特征在于, 所述InDel标记为鸡核糖体蛋白 大亚基3‑like基因启动子区的一个插 入缺失标记, 其核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。 2.检测权利要求1所述 InDel标记的检测引物。 3.根据权利 要求2所述InDel标记的检测引物, 其特征在于, 包括上游引物和下游引物, 其核苷酸序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示。 4.权利要求1所述InDel标记的检测试剂盒, 其特征在于, 所述试剂盒中含有权利要求2 或3所述检测引物。 5.权利要求1所述InDel标记、 权利要求2或3所述检测引物或权利要求4所述试剂盒在 鸡屠体性状分子标记辅助选 育中的应用。 6.根据权利 要求5所述应用, 其特征在于, 选择权利要求1所述InDel标记插入纯合基因 型的鸡个 体进行培 育, 即II基因型纯合子。 7.根据权利要求5所述应用, 其特征在于, 所述屠体性状为宰前活重、 全净膛重和/或胸 肉重。 8.一种选 育屠体性状好的鸡个 体的方法, 其特 征在于, 包括以下步骤: S1.提取待测鸡个 体的基因 组DNA; S2.分别以步骤S1所得DNA和InDel标记插入型对照质粒为模板, 利用权利要求2或3所 述检测引物进行PCR扩增; S3.对步骤S2所 得PCR扩增产物进行电泳分析; S4.结果判定: 若出现大小与对照质粒扩增所得条带相同的单一条带, 则表明所测鸡个 体为InDel标记插入纯合基因型, 即II基因型纯合子; 若出现比对照质粒扩增所得条带小 42bp的单一条带, 则表 明所测鸡个体为InDel标记缺失纯合基因型, 即DD基因型纯合子; 若 出现大小相差42b p且较大的一条带与对照质粒扩增所得条带相同的双条带, 则表明所测鸡 个体为单个染色体缺 失基因型, 即ID 基因型杂合子; 其中, II基因型纯合子鸡个体则为屠体 性状好的鸡个 体。 9.根据权利要求8所述方法, 其特征在于, 若仅 通过电泳无法准确判断所测鸡个体是否 为II基因型纯合子, 则对 所得单一条带进 行测序, 若测序所得序列中含有SEQ ID NO.5所示 序列, 则表明所测鸡个 体为II基因型纯合子; 反 之则表明所测鸡个 体为DD基因型纯合子。 10.根据权利要求8所述方法, 其特征在于, 所述屠体性状为宰前活重、 全净膛重和/或 胸肉重。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 114959061 A 2一种选育屠体性状好的鸡个体的方 法 技术领域 [0001]本发明属于分子选育技术领域。 具体地, 涉及一种选育屠体性状好的鸡个体 的方 法。 背景技术 [0002]屠体性状作为畜禽主要的经济性状, 一直是禽畜品种选育 的一个重要指标。 而在 肉鸡品种的选育中, 与鸡个体重量相关的指标, 如宰前活重、 胸肉重等, 是其屠体性状中最 受关注的一类。 如何改善鸡屠体性状, 尤其是与鸡个体重量相关的屠体性状, 也一直是鸡育 种工作中的重点。 [0003]核糖体蛋白大亚基3 ‑like(RPL3L)是大亚基核糖体蛋白中的一员。 有研究发现, 在 小鼠成肌细胞系(C2C12)中过表达RPL3L会抑制肌管的融合, 另通过腺病毒感染小鼠发现, 敲低RPL3L能增强小鼠的肌肉力量, 肌肉长度显着增加 。 鸡的体重约有40%来自于骨骼肌, 骨骼肌的发育与其个体重量、 肉类产量及质量密切相关, 但RPL3L是否能影响家 禽骨骼肌生 长发育尚不清楚。 [0004]InDel(insertion ‑deletion)插入缺失标记是基因组上发生的一段短片段的核苷 酸插入或缺失, 是同源序列比对产生空位(gap)的现象。 而在基因组插入缺失位点的上下 游, 设计一些扩增这些插入缺失位点的PCR引物, 这就是InDel分子标记。 InDel是分子标记 辅助选择(MAS)中常用的一种分子育种技术, 它广泛存在于生物群体内并且能够精准和稳 定遗传地给后代。 InDel作为一种稳定的DNA分子标记, 已经被广泛应用于包括鸡在内的各 种动物的大规模育种工作中, 而持续挖掘与鸡屠体性状相关的InDel标记有助于我国鸡遗 传育种工作的发展。 发明内容 [0005]本发明的目的是丰富与鸡屠体性状相关的InDel标记, 提供一种选育屠体性状好 的鸡个体的方法。 [0006]本发明的第一个目的是提供一种与鸡屠体性状相关的I nDel标记。 [0007]本发明的第二个目的是提供检测所述 InDel标记的检测引物。 [0008]本发明的第三个目的是提供 所述InDel标记的检测试剂盒。 [0009]本发明的第四个目的是提供所述InDel标记、 所述InDel标记检测引物或所述 InDel标记检测试剂盒在鸡屠体性状分子标记辅助选 育中的应用。 [0010]本发明的第五个目的是提供一种选 育屠体性状好的鸡个 体的方法 [0011]本发明上述目的通过以下技 术方案实现: [0012]本发明在鸡核糖体蛋白大亚基3 ‑like基因(RPL3L, 位于14号染色体, 参考基因组 GRCg6a, chrome 14)的启动子区发现了长42bp的InDel标记, 进一步实验发现该InDel标记 与鸡屠体性状显著相关。 在此基础上, 本发明还提供了检测所述InDel标记的检测引物、 检 测试剂盒及其在鸡屠体性状分子标记辅助选 育中的应用。说 明 书 1/6 页 3 CN 114959061 A 3
专利 一种选育屠体性状好的鸡个体的方法
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