(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211132077.5 (22)申请日 2022.09.16 (71)申请人 温州医科 大学附属第一医院 地址 325000 浙江省温州市瓯海区南白象 街道 (72)发明人 沈贤　郑建建　薛向阳　陈孝冬　 胡宇航　 (74)专利代理 机构 杭州万合知识产权代理事务 所(特殊普通 合伙) 33294 专利代理师 万珠明　余冬 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种胃癌的血清诊断标志物、 测定方法及其 应用 (57)摘要 本发明公开了一种胃癌的血清诊断标志物、 测定 方 法 及其 应 用 ， 具 体的 该 标 志 物 为 LINC01163。 本发明所述LINC01163作为胃癌标志 物， 经验证该LINC01163与胃癌的发生相 关性显 著且具有良好的灵敏度和特异性。 本发明提供的 检测方法可以用于胃癌的早期筛查， 实现胃癌患 者早期诊断并提高检测便利性。 本发明所述的 LINC01163在诊断胃癌方面具有很好的临床应用 价值。 权利要求书1页 说明书4页 附图2页 CN 115505642 A 2022.12.23 CN 115505642 A 1.一种胃癌的血清诊断标志物， 其特征在于： 所述血清诊断标志物为LINC01163， 所述 LINC01163是一种L ncRNA。 2.检测LINC01633的试剂在制备诊断 胃癌的产品中的应用。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特 征在于： 所述试剂包括实时荧 光定量PCR检测试剂。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于： 所述的实时荧光定量PCR检测试剂包括进 行实时荧 光定量PCR的特异性引物： LINC01163正向引物： 5 ′ ‑GAGTCCTGACCTGGATCCCT‑3′, LINC01163反向引物： 5 ′ ‑GGGGCACTGTGAT TGTCTCA‑3′。 5.根据权利要求3或4所述的应用， 其特征在于， 所述的实时荧光定量PCR检测试剂包 含： 内参基因GAP DH特异性PCR引物： 正向引物： 5 ’ ‑GCTAGGGACGGCCTGAAG‑3’； 反向引物： 5 ’ ‑GCCCAATACGACCAAATCCGT‑3’。 6.根据权利要求1所述的胃癌的血清诊断标志物的测定方法， 其特征在于： 包括以下步 骤： S1： 采集健康人和胃癌 患者的外周血， 待血 液标本凝结后， 分别收集血清； S2： 抽提血清中的l ncRNAs， 并以此为模板将L INC01163逆转录为cDNA； S3： 用LINC01163特异性的RT ‑PCR引物进行实时荧光定量PCR， 获得LINC01163的相对表 达量； S4： 将待测人员血清中LINC01163的表达量与健康人员血清中的表达量进行差异分析 并绘制ROC曲线， 再通过S PSS软件进行差异分析和相关性分析。 7.根据权利要求6所述的胃癌诊断标志物的测定方法， 其特征在于： 步骤S2中， 抽提的 lncRNAs浓度要求A 260/280的比值在1.8 ‑2.0之间。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115505642 A 2一种胃癌的血清诊断标志物、 测定方 法及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药技术领域， 特别涉及一种胃癌的血清诊断标志物、 测定方法 及其应用。 背景技术 [0002]胃癌(GC)是全球第四大最常见的恶性疾病， 也是全球癌症相关死亡的第二大原 因。 尽管在过去几十年中GC患者的生存率显着改善， 但GC通常在晚期被诊断出来， 并且由于 复发率高且预后差， GC患者的总体生存率仍较低。 由于GC在进展到晚期之前大多是无症状 的， 因此使用有效的筛查方法进行早期检测对于降低GC死亡率非常重要。 生物标志物是作 为正常生物过程、 致病 过程或对治疗干预 的药理反应的指标进行客观测 量和评估的特征。 基因组分析的最新进展已经发现了与DNA， RNA， 外泌体等相关的各种生物标志物。 这些生物 标志物在癌症治疗领域的开发有望极大地促进癌症的进展。 GC是一种异质性疾病， 其中每 个癌症患者 都表现出不同的遗传和分子特征， 因此尽管已经对分子生物 标志物进 行了大量 研究， 但有效预测标志物仍及其缺乏。 因此， 对于胃癌的诊断和治疗， 仍存在许多未知需研 究探索， 探究胃癌的发病机制对于揭示胃癌的本质以及开发新的治疗都至关重要。 [0003]LncRNA通常定义为长度超过200个核苷酸且不能翻译成蛋白质的转录本， 被认为 在转录和转录后水平上调节胃癌的进展。 在转录水平上， lncRNA通过改变染色质修饰和 mRNA稳定来调节mRNA和miRNA表达， 从而诱导胃癌进展。 此外， lncRNA通过与miRNA完全结合 以产生ceRNA或在转录后水平上促进蛋白质稳定来调节胃癌进展。 从机制上讲， lncRNA作为 癌基因或抑癌基因调控胃癌相关信号通路， 参与胃癌恶性增殖、 转移、 侵袭、 凋亡、 耐药性等 生物学过程。 此外， lncRNA对胃癌的诊断、 治疗和预后也有一定的临床价值。 目前已经发现 多种lncRNA与胃癌密切相关， 如L ncRNA SNHG1、 LncRNA SND1‑IT1、 以及L ncRNA DLEU2等。 [0004]目前， 关于lncRNA在胃癌中的相关调控机制仍有待进一步研究， 在胃癌中对 lncRNA的更大关注可以为癌症发展机制的阐明提供新的见解， 以及对胃癌的诊断、 治疗和 预防等都具有重要作用并可能作为 新的抗癌靶点。 发明内容 [0005]为了弥补现有技术的不足， 本发明提高了一种胃癌的血清诊断标志物、 测定方法 及其应用， 目的在于提出LINC01163能作为胃癌发病早期的诊断标志物， 通过检测待测者血 清中LINC01163的表达水平， 实现胃癌 患者的早期诊断。 [0006]为了实现上述目的， 本发明采用如下技 术方案： [0007]一种胃癌的血清诊断标志物， 所述血清诊断标志物为LINC01163， 所述LINC01163 是一种LncRNA。 [0008]检测LINC01633的试剂在制备诊断 胃癌的产品中的应用。 [0009]上述的应用， 所述试剂包括实时荧 光定量PCR检测试剂。 [0010]前述的应用， 所述的实时荧光定量PC R检测试剂包括进行实时荧光定量PC R的特异说　明　书 1/4 页 3 CN 115505642 A 3