(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211263450.0 (22)申请日 2022.10.14 (71)申请人 河北省农林科 学院粮油作物研究所 地址 050035 河北省石家庄市高新区恒山 街162号 (72)发明人 安洪周　高增玉　王江浩　李魁英　 王延兵　 (74)专利代理 机构 北京卓胜佰达知识产权代理 有限公司 16 026 专利代理师 刘冬梅 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/6869(2018.01) (54)发明名称 一种糯玉米wx基因自然突变体及分子标记 和应用 (57)摘要 本发明属于基因工程领域， 具体涉及一种玉 米wx基因自然 突变体， 其相对于野生型基因在第 1外显子301核苷酸位置有12bp的插入， 引起核苷 酸序列的改变， 是一个新的 的wx基因突变 类型。 权利要求书1页 说明书4页 附图6页 CN 115418411 A 2022.12.02 CN 115418411 A 1.一种糯玉米wx基因自然突变 体DNA序列， 如SEQ  ID NO： 1所示。 2.一种糯玉米wx基因自然突变 体氨基酸序列， 如SEQ  ID NO： 2所示。 3.一种如权利要求1所述的糯玉米wx基因自然突变体在生物材料及其在育种中的应 用。 4.一种用于检测糯玉米wx基因自然突变体的引物对， 由引物Indel301 ‑F1和引物 Indel301 ‑R1组成， 其 中引物Indel301 ‑F1如SEQ ID NO： 3所示， 引物Indel301 ‑R1如SEQ ID  NO： 4所示。 5.一种如权利要求 4所述的引物对在检测糯玉米wx基因自然突变 体中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115418411 A 2一种糯玉米wx基因自然突变体及分子标记和应用 技术领域 [0001]本发明涉及植物分子生物学技术领域， 具体涉及一种玉米wx基因自然突变体及其 分子标记和应用。 背景技术 [0002]玉米(Zea  mays L.)是世界上重要的粮食、 经济和饲料作物， 种植面积 位居世界第 三。 玉米淀粉在人类生活及工业生产中应用广泛， 其所包含的直链淀粉和支链淀粉具有非 常高的经济价值。 糯玉米起源于中 国， 也叫做蜡质玉米或者粘玉米。 糯玉米属于玉米的一个 亚种。 糯玉米胚乳中约95％～100％都是支链淀粉， 几乎不含有直链淀粉(罗高玲等,2003)， 因此具有粘、 软、 细、 柔 等特点， 风味独特， 食味品质优良且营养 丰富， 倍受消费者的青睐。 [0003]糯玉米的糯性是 由一对隐性基因(wxwx)控制， Sprague等通过研究把糯玉米wx基 因定位在第9号染色体上(Sprague  G F et al, 1997)。 野生型Wx基因位点位于第9染色体 的短臂上， 基因全长  3718bp， 由14个外显子和13个内含子构成， 编码60kd的颗粒结合型淀 粉合成酶(Granule ‑Bound Starch Synthase， GBSSI)， 该酶主要控制玉米胚乳和花粉的直 链淀粉合成。 在wx突变体中， GBSSI  酶活性降低， 直链淀粉的合成受阻， 导致玉米籽粒胚乳 及花粉中直链淀粉含量降低， 从而转化成支链淀粉， 使玉米具有糯性(李芳芳等,  2018； 李 祥栋等,2015； 谭彩霞等,20 08)。 [0004]目前， 已经发现和分离出了许多种由自发或诱导产生的突变体， 突变位置遍布整 个wx基因。 其中一大部 分是通过序列大小不一的转座子或反转座子插入到基因的不同位置 造成的糯性突变。 它们分别是  wx‑m1、 wx‑m6、 wx‑m7、 wx‑m9、 wx‑B4等由转座子AC ‑Ds插入形 成； wx‑m8由Spm控制家族的转座子插入形成以及wx ‑Stonor、 wx ‑G、 wx‑65、 wx‑Cin4、 wx‑ Reina、 wx ‑I、 wx‑K、 wx‑B5等由反转座子插入而产生。 还有一些稳定的wx突变体是在wx基因 关键位置发生缺失或插入突变， 如wx ‑D7、 wx‑D10分别是waxy1第7外显子和第10外显子发生 碱基缺失导 致突变的发生(fan， 20 08； 田孟良20 08)。 [0005]糯玉米种质资源丰富， 除了上述这些突变类型外， 还可能存在一些新的未知的wx 基因突变类型， 这些稀缺的wx基因突变在糯玉米种质选育过程中容易被忽略并丢失。 因此， 发掘新的wx基因突变体并开发其分子标记， 不仅可以拓展糯玉米的种质资源， 为特用玉米 新品种选 育提供材料基础， 还能促进糯玉米分子标记辅助育种的应用。 发明内容 [0006]本发明提供玉米wx基因自然突变体， 其相对于野生型基因在第1  外显子301核苷 酸位置有12bp的插入， 引起核苷酸序列及氨基酸序列的改变。 是一个新的的wx基因突变类 型， 拓展了糯玉米的种质资源， 为特用玉米新品种选育提供材料基础。 本发 明还提供wx基因 突变体的分子标记， 促进糯玉米分子标记辅助育种的应用， 可实现糯玉米的苗期选择从而 缩短育种周期。 [0007]为解决上述问题， 本发明使用如下技 术方案。说　明　书 1/4 页 3 CN 115418411 A 3