(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210588834.3 (22)申请日 2022.05.26 (71)申请人 中国人民解 放军军事科学院军事医 学研究院 地址 100000 北京市海淀区太平路27号 (72)发明人 王升启　张庆珍　周喆　王雪倩　 (74)专利代理 机构 北京超凡宏宇专利代理事务 所(特殊普通 合伙) 11463 专利代理师 王闯 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/6837(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种用于 个体识别的引物组、 试剂盒及应用 (57)摘要 本发明提供了一种用于个体识别的引物组、 试剂盒及应用， 涉及生物技术领域。 本发明提供 了一种人 染色体InDel基因座在个体识别中的应 用， 发明人挑选 出了25个常染色体InDel基因座， 与Amel结合， 组成2 6‑plex InDels， 经验证， 该体 系满足Hardy ‑Weinberg平衡同时各基因座间处 于连锁平衡状态， 26 ‑plex InDels体系的累计个 体识别率为0.999999999970783， 满足个体识别 的要求， 能够用于个体识别。 本发明提供的引物 组能够特异性强， 灵敏度高， 能够实现对上述26 个InDel基因座的扩增。 本发明提供的探针能够 特异性捕获上述引物组的扩增产物。 本发明提供 的基因芯片特异性强， 灵敏度高， 稳定性好， 数据 可靠。 权利要求书1页 说明书15页 序列表18页 附图5页 CN 114959058 A 2022.08.30 CN 114959058 A 1.一种人染色体I nDel基因座在个 体识别中的应用； 所述InDel基因座包括： rs56113354、 rs76989317、 rs66493016、 rs34564973、 rs5849187、 rs71843136、 r s2307807、 r s139101426、 r s33955557、 rs56110100、 r s10541877、 rs10656522、 rs59027185、 rs3028599、 rs10535391、 rs145041883、 rs56348842、 rs10667259、 rs35105918、 rs372779701、 rs146109101、 rs3993057、 rs34105738、 rs10544053、 rs11471707 和Amel。 2.一种扩增权利要求1中所述InDel基因座的引物组， 其特征在于， 所述引物组的序列 如SEQ ID NO.1～SEQ  ID NO.60所示。 3.一种个 体识别的方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： a.以待测样品的DNA为模板， 采用权利要求2所述的引物组进行扩增； b.根据a步骤的扩增结果进行I nDel基因座的分型； c.根据基因座的基因型进行个 体识别； 所述InDel基因座包括： rs56113354、 rs76989317、 rs66493016、 rs34564973、 rs5849187、 rs71843136、 r s2307807、 r s139101426、 r s33955557、 rs56110100、 r s10541877、 rs10656522、 rs59027185、 rs3028599、 rs10535391、 rs145041883、 rs56348842、 rs10667259、 rs35105918、 rs372779701、 rs146109101、 rs3993057、 rs34105738、 rs10544053、 rs11471707 和Amel。 4.根据权利要求3所述的方法， 其特征在于， 扩增体系中， 分别用于扩增rs56113354、 rs76989317、 rs66493016、 rs34564973、 r s5849187、 r s71843136、 rs2307807、 r s139101426、 rs33955557、 rs56110100、 rs105418 77、 rs10656522、 r s59027185、 rs3028599、 r s10535391、 rs145041883、 rs56348842、 rs10667259、 rs35105918、 rs372779701、 rs146109101、 rs3993057、 rs34105738、 rs10544053、 rs11471707和Amel的引物的浓度比为2.25:1:2.25: 1.5:2.25:1.5:2:3:1:1.5:1.5:1.5:1.75:1.5:1.5:2.5:3:1.25:2:1.25:2.5:2.5:4.25:2: 1.5:1.5。 5.根据权利要求3所述的方法， 其特征在于， 所述引物组的PCR反应程序为： 94℃变性 1min； 94℃变性3 0s， 60℃退火45s， 72℃延伸45s， 共32个 循环； 72℃延伸10mi n。 6.一组探针， 其特 征在于， 所述探针捕获权利要求2所述引物组PCR扩增产物。 7.根据权利要求6所述的探针， 其特征在于， 所述探针具有如SEQ  ID NO.61～SEQ  ID  NO.111所示的序列。 8.根据权利要求6所述的探针， 其特 征在于， 所述探针5 ’端用氨基进行化学修饰。 9.一种基因芯片， 其特 征在于， 包括权利要求6 ‑8任一项所述的探针。 10.一种试剂盒， 其特征在于， 包括权利要求2所述的引物组、 权利要求6 ‑8任一项所述 的探针或权利要求9所述的基因芯片中的至少一种。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114959058 A 2一种用于个体识别的引物组、 试剂盒及应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物技术领域， 尤其是涉及一种用于个体识别的引 物组、 试剂盒及应 用。 背景技术 [0002]专利(申请号： 2022102199 480)提供了人染色体66个InDel基因座在个体识别或亲 权鉴定中的应用。 发明人从dbSNP数据库中自主筛选66个InDel基因座， 并评估了66 ‑plex  InDels(66个InDel基因座)在251名中国汉族 人群中群体遗传学参数， 分析其法医学应用价 值。 结果表明： 66个InDel基因座在中国汉族人群中具有良好的遗传多态性， 可独立应用于 法医个体识别和亲权鉴定研究。 [0003]Sanger测序因其读长长、 数据可靠、 精度高， 被誉为测序技术的 “金标准”， 但是其 通量小、 成本高、 速度慢、 仪器便携性差。 二代测序技术解决了通量小、 成本高、 速度慢等问 题， 实现了样本的快速检测， 但是二代测序技术数据分析步骤繁杂、 同时仪器运行环境要求 较高， 不适用于现场快速检测 。 基因芯片通过碱基之间的互补配对， 将PCR扩增的核苷酸序 列与探针结合进 行杂交， 除了通量高、 速度快、 成本低之外， 芯片可适用性 强， 适配仪器多为 小型仪器， 便携性好； 分型结果简单， 观察芯片信号即可判定结果； 操作简单， 利于推广应 用。 鉴于专利(申请号： 2022102199480)筛选出的InDel遗传标记， 有必要采用生物基因芯片 技术自主构建I nDel基因芯片分型体系用于个 体识别的研究。 [0004]有鉴于此， 特提出本发明。 发明内容 [0005]本发明的第一目的在于提供一种人染色体I nDel基因座在个 体识别中的应用。 [0006]本发明的第二目的在于提供一种扩增上述 InDel基因座的引物组。 [0007]本发明的第三目的在于提供一种个 体识别的方法。 [0008]本发明的第四目的在于提供一组探针。 [0009]本发明的第五目的在于提供一种基因芯片。 [0010]本发明的第六目的在于提供一种试剂盒。 [0011]第一方面， 本发明提供了一种人染色体I nDel基因座在个 体识别中的应用； [0012]所述InDel基因座包括： rs56113354、 rs76989317、 rs66493016、 rs34564973、 rs5849187、 rs71843136、 r s2307807、 r s139101426、 r s33955557、 rs56110100、 r s10541877、 rs10656522、 rs59027185、 rs3028599、 rs10535391、 rs145041883、 rs56348842、 rs10667259、 rs35105918、 rs372779701、 rs146109101、 rs3993057、 rs34105738、 rs10544053、 rs11471707 和Amel。 [0013]第二方面， 本 发明提供了一种扩增上述InDel基因座的引物组， 所述引物组的序列 如SEQ ID NO.1～SEQ  ID NO.60所示。 [0014]第三方面， 本发明提供了一种个 体识别的方法， 包括如下步骤：说　明　书 1/15 页 3 CN 114959058 A 3