(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210673066.1 (22)申请日 2022.06.14 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114908196 A (43)申请公布日 2022.08.16 (73)专利权人 中国疾病预防控制中心病毒病预 防控制所 地址 100850 北京市昌平区昌百路15 5号病 毒病所 (72)发明人 赵翔　王大燕　隗合江　李希妍　 (74)专利代理 机构 北京预立 生科知识产权代理 有限公司 1 1736 专利代理师 高倩倩 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01)C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12N 7/00(2006.01) C12N 15/44(2006.01) C07K 14/11(2006.01) C07K 16/10(2006.01) A61K 39/145(2006.01) A61P 31/16(2006.01) C12R 1/93(2006.01) 审查员 唐亚丽 (54)发明名称 一种特异性检测病毒的试剂及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种特异性检测病毒的试剂 及其应用， 具体的涉及检测感染人的H3N8亚型病 毒HA基因的引物探针和/或检测NA 基因的引物探 针。 本发明同时公开了感染人的H3N8亚型病毒及 其衍生品及其应用。 权利要求书1页 说明书13页 序列表5页 附图1页 CN 114908196 B 2022.11.18 CN 114908196 B 1.一种检测感染人的H3N8病毒的试剂， 其特征在于， 所述试剂包括特异性针对该病毒 HA基因的引物和 寡核苷酸探针； 以及特异性针对NA基因的引物和寡核苷酸探针； 所述特异 性针对该病毒HA 基因的引物的序列如SEQ  ID NO： 5和SEQ  ID NO： 6所示， 寡核苷酸探针的序 列如SEQ ID NO： 7所示； 所述特异性针对NA 基因的引物的序列如SEQ  ID NO： 8和SEQ  ID NO： 9所示； 寡核苷酸探针的序列如SEQ  ID： 10所示。 2.根据权利要求1所述的试剂， 其特征在于， 所述寡核苷酸探针或引物与可检测标记偶 联。 3.根据权利要求2所述的试剂， 其特征在于， 可检测标记选自放射性元素、 酶、 抗体或荧 光化学物质。 4.一种检测感染人的H3N8病毒的产品， 其特征在于， 所述产品包括权利要求1 ‑3任一项 所述的试剂。 5.根据权利要求4所述的产品， 其特征在于， 针对HA基因和NA基因 的检测试剂位于一个 容器中。 6.根据权利要求4所述的产品， 其特征在于， 针对HA基因和NA基因 的检测试剂位于不同 的容器中。 7.根据权利要求4 ‑6任一项所述的产品， 其特征在于， 所述产品还包括检测内参的试 剂。 8.根据权利要求4 ‑6任一项所述的产品， 其特征在于， 所述产品还包括处理样本的试 剂。 9.权利要求1 ‑3任一项所述的试剂、 权利要求4 ‑8任一项所述的产品在制备检测感染人 的H3N8病毒感染的产品中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114908196 B 2一种特异性检测病毒 的试剂及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药 领域， 涉及一种特异性检测病毒的试剂及其应用。 背景技术 [0002]禽流感(Avian  influenza， AI)是由禽流 感病毒(Avian  influenza  virus， AIV)引 起的一种禽呼吸性的传染病， 可感染多种家禽和野生鸟类， 也可感染其他动物及人类 (Krammer  F,Smith G,Fouchier  R,et al.Influenza[J].Nature  Reviews Disease  Primers,2018.)， 造成重大的社会生态危害， 也可造成重大的社会经济损失。 [0003]AIV属于正粘病毒 科， 甲型流感病毒属(Influenzavirus  A)， 属于单股负链核糖核 酸(RibonucleicAcid,RNA)， 共8个节段编码10种蛋白质。 病毒颗粒呈球形或多边形， 有些也 呈丝状。 病毒颗粒直径大小约为80 ‑120nm， 但呈丝状的大小 可达几百纳米， 病毒基因组全长 约为13.6kb， 由8个结构蛋白:血凝素(Hemagglutinin,HA)、 神 经氨酸酶(Neuraminidase, NA)、 基质蛋白1(Matrix  Protein 1,M 1)、 基质蛋白2(Matrix  Protein 2,M2)、 核蛋白 (Nucleop rotein,NP)、 聚合酶碱性蛋白1(Polymerase  Basic Protein 1,PB1)、 聚合酶碱性 蛋白2(Pol ymerase Basic Protein 2,PB2)、 聚合酶酸性蛋白(Pol ymerase Acid Protein, PA)， 组成病毒的基本结构。 位于宿主细胞质中含两个非结构蛋白:NS1(Non ‑structural   Protein 1,NS1)蛋白和NS2(Non ‑structural  Protein 2,NS2)蛋白。 HA作为整 合I型囊膜 糖 蛋白主要参与介导血凝活性及抗体介导的病毒中和活性。 NA属于II型囊膜糖蛋白， 主要参 与细胞受体睡液酸残释放病毒， 并通过抗体介导的病毒中和作用阻止病毒在体内扩散。 NP 主要为结构蛋白与病毒RNA片段相关。 M1是非糖基化结构蛋白， 存在于病毒囊膜下。 M2为整 合的III型囊膜糖蛋白。 PB1、 PB2和PA为多聚酶复合物， 与病毒RNA复制转录翻译有关。 目前， 已经在鸟类 中发现了16种HA(Hl ‑H16)和9种NA(N1 ‑N9)亚型的AIV， 但是新的HA(H17和H18) 和NA(N10和N1 1)亚型仅在蝙蝠中有所发现。 [0004]流感病毒感染宿主范围主要取决于流感病毒的血凝素蛋白与宿主细胞表面流感 病毒受体的相互作用。 目前普遍认为流感病毒的受体为唾液酸受体， 可以分为唾液酸a ‑2, 3‑Gal受体和唾液酸a ‑2,6‑Gal受体。 一般认为禽流 感病毒倾向于结合a ‑2,3受体， 而人流 感 病毒倾向于结合a ‑2,6受体。 宿主体内不同类型受体的分布差异是流感病毒跨物种传播的 主要屏障。 [0005]近期， 国内发现禽H3N8亚型流感病毒感染人， 而使用之前的季节性流感H3亚型检 测引物无法检测出该病毒， 设计新的检测方法对于实现感染人的H3N8病毒的检测具有重要 的意义。 发明内容 [0006]为了弥补现有技术的不足， 本 发明的目的之一是提供一种感染人的H3N8病毒的检 测试剂。 [0007]本发明的目的之二是提供一种感染人的H 3N8病毒的检测方法。说　明　书 1/13 页 3 CN 114908196 B 3