(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210757327.8 (22)申请日 2022.06.29 (71)申请人 北京林业大 学 地址 100000 北京市海淀区清华 东路35号 (72)发明人 陈仲　郝颖颖　韩开元　赵田芸　 杨雄　 (74)专利代理 机构 成都为知盾专利代理事务所 (特殊普通 合伙) 51267 专利代理师 杨宜付 (51)Int.Cl. C12N 15/29(2006.01) C07K 14/415(2006.01) C12N 15/84(2006.01) C12N 1/21(2006.01) C12N 15/11(2006.01)A01H 5/02(2018.01) A01H 5/12(2018.01) A01H 6/00(2018.01) C12Q 1/6895(2018.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种毛白杨PtYAB BY7基因及其应用 (57)摘要 本发明公开一种毛白杨PtYABBY7基因及其 应用， 所述基因在植物中进行表达， 用于调控植 物开花时间和/或叶片形态， 所述PtYABBY7基因 包含选自下组的核苷酸序列： A、 序列表Seq  ID  NO.1所示核苷酸序列； B、 与A所述序列互补的核 苷酸序列， 或具有70％以上同源性的核苷酸序 列； C、 编码序列表Seq  ID NO.2所示的氨基酸序 列的核苷酸序列。 Pt YABBY7基因在毛白杨营养组 织和雌雄花芽发育的8个时期中出现差异表达； 主要在雌花芽发育过程中表达， 且基因表达变化 明显； 在雄花芽和营养组织中表达极低； 在调控 杨树开花以及侧生器官生长发育中的重要作用， 为解决杨树春季飞絮问题和积累木质生物量带 来可能。 权利要求书1页 说明书8页 序列表5页 附图7页 CN 115094072 A 2022.09.23 CN 115094072 A 1.一种毛白杨PtYABBY7基因， 其特征在于， 在植物中进行表达， 以调控植物开花时间 和/或叶片形态， 所述PtYAB BY7基因包 含选自下组的核苷酸序列： A、 序列表Seq  ID NO.1所示核苷酸序列； B、 与A所述序列互补的核苷酸序列， 或具有70％以上同源性的核苷酸序列； C、 编码序列表Seq  ID NO.2所示的氨基酸序列的核苷酸序列。 2.根据权利要求1所述毛白杨PtYAB BY7基因， 其特 征在于， 所述 植物为木 本植物。 3.根据权利要求2所述毛白杨PtYAB BY7基因， 其特 征在于， 所述 植物为毛白杨。 4.一种由权利要求1所述毛白杨PtYABBY7基因编码的蛋白质， 其特征在于， 所述蛋白质 的氨基酸序列选自序列表Seq  ID NO.2所示的氨基酸序列。 5.一种用于克隆毛白杨PtYABBY7基因的引物对， 其特征在于， 所述引物对的碱基序列 如下： 第一上游引物F： 5 ’ ‑ATGTCAACATTGAACCATCTCTTT‑3’； 第一下游引物R： 5 ’ ‑TCACTCAAAGGGAGTGTTTGTCC‑3’。 6.根据权利要求1所述的引物对， 其特征在于， 所述引物对的碱基序列还包括酶切位 点， 包括酶切位 点的引物对的碱基序列如下： 第二上游引物F： 5 ’ ‑AGAACACGGGGGACTCTTGACATGTCA ACATTGAACCATCTCTTT‑3’； 第二下游引物R： 5 ’ ‑GGGGAAATTCGAGCTG GTCACTCACTCA AAGGGAGTGTTTGTCC‑3’。 7.一种毛白杨PtYABBY7基因的荧光定量引物对， 其特征在于， 所述荧光定量引物对的 碱基序列如下： 第三上游引物F： 5 ’ ‑ACGGTGGTGACTGTGATA ‑3’； 第三下游引物F： 5 ’ ‑GCTGAGAG GAGTTGAAAGATT‑3’。 8.一种含有PtYABBY7基因的表达载体， 其特征在于， 利用限制性内切酶BstEII ‑HF和 Ncol‑HF将pCAMBIA1301载体质粒进行双酶切， 使用 ⅡOne Step Cloning  Kit进行载体连接， 获得 过表达载体pCAMBIA13 01‑PtYABBY7。 9.一种含有权利要求8所述过表达载体的宿主细胞， 其特征在于， 将所述过表达载体 pCAMBIA13 01‑PtYABBY7装入农杆菌GV3101， 获得宿主细胞。 10.一种权利要求1所述毛白杨PtYABBY7基因的用途， 其特征在于， 用于培育不同开花 时间和/或叶片形态的毛白杨新品种。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115094072 A 2一种毛白杨PtYAB BY7基因及其应用 技术领域 [0001]本发明属于植物基因工程领域， 涉及一种影响植物开花时间的基因， 一种影响植 物叶片形态的基因， 涉及该基因编 码的蛋白质， 涉及 含有该基因的表达载体和宿主细胞， 涉 及从植物DNA中克隆该基因引物组， 以及该基因的用途。 背景技术 [0002]毛白杨(Populus  tomentosa)属杨柳科(Salicaceae)树种， 树干通直， 材质优良， 为我国特有乡土树种， 在用材林建设、 生态防护以及城乡绿化等方面具有重要的经济价值 和生态价 值。 [0003]作为典型的多年 生木本植物， 前 人对其开花分子调节机制已经研究非常广泛。 [0004]杨树FT(FLOWERINGLOCUST)亚类基因FT1、 FT2在拟南芥中过表达能够诱导开花时 间提前， 与FT过表达转基因表型相 似。 毛果杨FT1过表达转基因幼树能够产生花序， 但较大 植株更容易开花， 幼小树木往往导致不完整的花器官， 该基因的表达水平对杨树的开花时 间有决定性作用， 达 到一定的临界水平才能完成开 花过程。 [0005]LFY(LEAFY)、 AP1(APETALA1)在杨树腋生分生组织中高度表达， LFY被抑制会产生 不育植株， 不育RNAi –PtLFY转基因植株的花芽中PaLFY表达减少， 花序发育不完全。 [0006]杨树花器官发育阶段， A类基因PtAP1 ‑1和PtAP1 ‑2在雌雄花芽中季节表达模式相 似， PtAP1 ‑1转录水平相对高于PtAP1 ‑2， 参与杨树花器官的形成与性别分化。 B类基因PdPI (PISTILLATA)在美洲黑杨根系、 叶片、 雌雄花序中均有表达， 在花被和花药中表达水平较 高， 而花梗和成熟花粉中表达微弱。 Chen等研究表明AP3和PI在毛白杨花芽发育后期高表 达， 可能在花粉发育过程中发挥重要作用。 [0007]C类基因AG(AGAMOUS)同源基因(AG1、 AG2)均在毛果杨雌、 雄花的花分生组织内轮 (雌蕊和雄蕊)发育过程中表达， 与花器官发育ABCDE模型一 致。 [0008]毛白杨雄株散粉雌株飞絮造成环境影响， 并且具有较长童期， 阻碍遗传育种研究。 在杨树中开展花 发育的研究， 构建完整的开花分子调控网络， 对于加速育种周期、 提高木质 生物量积累 、 解决飞絮污染问题具有十分重要的意 义。 发明内容 [0009]鉴于此， 本发明目的在于提供一种能够影响植物开 花时间和叶片形态的基因。 [0010]本发明的目的之二在于提供一种由毛白杨PtYAB BY7基因编码的蛋白质。 [0011]本发明的目的之三在于提供一种用于克隆毛白杨PtYAB BY7基因的引物对。 [0012]本发明的目的之四在于提供一种毛白杨PtYAB BY7基因的荧 光定量引物对。 [0013]本发明的目的之五在于提供一种含有PtYAB BY7基因的表达载体。 [0014]本发明的目的之六在于提供一种PtYAB BY7基因的宿主细胞。 [0015]本发明的目的之七在于提供一种PtYAB BY7基因的用途。 [0016]发明人通过长期的探索和尝试， 以及多次的实验和努力， 不断的改革创新， 为解决说　明　书 1/8 页 3 CN 115094072 A 3