(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210748451.8 (22)申请日 2022.06.29 (71)申请人 斯贝福 （北京） 生物技 术有限公司 地址 100101 北京市延庆区八达岭经济开 发区西康路23号 (72)发明人 陈红　王妍　张晓晴　谢飞　 (74)专利代理 机构 北京同辉知识产权代理事务 所(普通合伙) 11357 专利代理师 孙艳敏 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种快速鉴定SCID系列小鼠Prkdc突变基因 型的组合物及方法 (57)摘要 本发明公开了一种快速鉴定SCID系列小鼠 Prkdc突变基因型的组合物及方法， 基于SCID小 鼠Prkdc基因外显子12161号碱基发生T到A的突 变， 以待测SCID系列小鼠Prkdc突变基因的基因 组DNA为模板， 按照快速鉴定SCID系列小鼠Prkdc 突变基因型的组合物进行PCR扩增， 得到PCR产 物， 凝胶电泳成像， 根据电泳结果中SCID系列小 鼠的产物 长度鉴定SCID系列小鼠Prkdc突变基因 型。 操作简单、 快速， 对仪器要 求低， 成本低， 仅通 过PCR和琼脂糖凝胶电泳即可快速鉴定SCID 小鼠 基因型。 权利要求书2页 说明书11页 序列表8页 附图2页 CN 115044670 A 2022.09.13 CN 115044670 A 1.一种快速鉴定SCID系列小鼠Prkdc突变基因型的组合物， 其特征在于， 基于SCID小鼠 Prkdc基因外 显子12161号碱基发生T到A的突变， 包括引物组： 第一组引物组合物， FI ‑F： 5’ ‑TGGTATCCACAACATAAAATACGCCAT‑3’(SEQ ID NO.1)， FI‑R： 5’ ‑TGGCCCCTGCTAACTTTCTCTTAACT‑3’(SEQ ID NO.2)， FO‑1F： 5’ ‑TGTCTGACTAGA AAGCTAGAGAGCTGT TCC‑3’(SEQ ID NO.3)， FO‑1R： 5’ ‑TACTGCTCAGA AGTGTGTGA AGTGCTTT‑3’(SEQ ID NO.4)； 或者 第二组引物组合物， FI ‑F： 5’ ‑TGGTATCCACAACATAAAATACGCCAT‑3’(SEQ ID NO.1)， FI‑R： 5’ ‑TGGCCCCTGCTAACTTTCTCTTAACT‑3’(SEQ ID NO.2)， FO‑2F： 5’ ‑ATCATGGTGATATGTGC CATGTCAGT ‑3’(SEQ ID NO.5)， FO‑2R： 5’ ‑ACAGTGAAGTGCCATACTGCTCAGA A‑3’(SEQ ID NO.6)； 或者 第三组引物组合物， FI ‑F： 5’ ‑TGGTATCCACAACATAAAATACGCCAT‑3’(SEQ ID NO.1)， FI‑R： 5’ ‑TGGCCCCTGCTAACTTTCTCTTAACT‑3’(SEQ ID NO.2)， FO‑2F： 5’ ‑ATCATGGTGATATGTGC CATGTCAGT ‑3’(SEQ ID NO.5)， FO‑3R： 5’ ‑GCCCTAAGAGTCACT TTCTCCATCTACA ‑3’(SEQ ID NO.7)。 2.一种快速鉴定SCID系列小鼠Prkdc突变基因型的方法， 其特征在于， 以待测 SCID系列 小鼠Prkdc突变基因的基因组DNA为模板， 按照权利要求1所述的快速鉴定SCID系列小鼠 Prkdc突变基因型的组合物进行PCR扩增， 得到PCR产物， 凝胶电泳成像， 根据电泳结果中 SCID系列小鼠的产物长度鉴定SCID系列小鼠Prkdc突变 基因型。 3.如权利要求2所述的快速鉴定SCID系列小鼠Prkdc突变基因型的方法， 其特征在于， 具体包括以下步骤： S1、 查询Prkdc基因外显子序列信息， 确认SCID系列小鼠Prkdc突变基因位点， SCID小鼠 Prkdc基因外 显子12161号碱基发生T到A的突变； S2、 获取SCID系列小鼠Prkdc突变基因位点上下游各500bp的核苷酸序列， 得到设计引 物序列SEQ  ID NO.9； S3、 设计引物， 并且设计鉴定SCID系列小鼠Prkdc突变 基因型的引物组合物； S4、 提取待检测SCID系列小鼠尾尖的基因 组DNA； S5、 以步骤S4 中的待检测 SCID系列小鼠尾尖的基因组DNA为模板， 按照步骤S3中的引物 组合物进行PCR扩增， 得到PCR产物； S6、 步骤S5的PCR产物进行凝胶电泳成像， 根据电泳结果中SCID系列小鼠的产物长度 鉴 定SCID系列小鼠Prkdc突变 基因型。 4.如权利要求2所述的快速鉴定SCID系列小鼠Prkdc突变 基因型的方法， 其特 征在于， 以待测SCID系列小鼠Prkdc突变基因的基因组DNA为模板， 使用第一组引物组合物进行 基因型鉴定时， 若电泳结果中SCID系列小鼠的产物长度为344bp和142bp， 则SCID系列小鼠 Prkdc突变基因型为野生型； 若电泳结果中SCID系列小鼠的产物长度为344bp、 255bp和 142bp， 则SCID系列小鼠Prkdc突变基因型为杂合子； 若电泳结果中SCID系列小鼠的产物长 度为344bp和255bp， 则SCID系列小鼠Prkdc突变 基因型为纯合子 。 5.如权利要求2所述的快速鉴定SCID系列小鼠Prkdc突变 基因型的方法， 其特 征在于， 以待测SCID系列小鼠Prkdc突变基因的基因组DNA为模板， 使用第二组引物组合物进行权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115044670 A 2基因型鉴定时， 若电泳结果中SCID系列小鼠的产物长度为383bp和156bp， 则SCID系列小鼠 Prkdc突变基因型为野生型； 若电泳结果中SCID系列小鼠的产物长度为383bp、 280bp和 156bp， 则SCID系列小鼠Prkdc突变基因型为杂合子； 若电泳结果中SCID系列小鼠的产物长 度为383bp和280bp， 则SCID系列小鼠Prkdc突变 基因型为纯合子 。 6.如权利要求2所述的快速鉴定SCID系列小鼠Prkdc突变 基因型的方法， 其特 征在于， 以待测SCID系列小鼠Prkdc突变基因的基因组DNA为模板， 使用第三组引物组合物进行 基因型鉴定时， 若电泳结果中SCID系列小鼠的产物长度为410bp和183bp， 则SCID系列小鼠 Prkdc突变基因型为野生型； 若电泳结果中SCID系列小鼠的产物长度为410bp、 280bp和 183bp， 则SCID系列小鼠Prkdc突变基因型为杂合子； 若电泳结果中SCID系列小鼠的产物长 度为410bp和280bp， 则SCID系列小鼠Prkdc突变 基因型为纯合子 。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115044670 A 3