(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210608204.8 (22)申请日 2022.05.31 (71)申请人 因顿健康科技 （苏州） 有限公司 地址 215200 江苏省苏州市吴江区开平路 3333号德尔广场B幢19 楼 (72)发明人 何荣军　王堃　 (74)专利代理 机构 北京冠和权律师事务所 11399 专利代理师 田春龙 (51)Int.Cl. C12Q 1/6851(2018.01) C12Q 1/6888(2018.01) C12N 15/11(2006.01) G16B 25/20(2019.01) G16B 40/10(2019.01)G16B 50/00(2019.01) (54)发明名称 一种快速 基因检测判断酒量的方法 (57)摘要 本发明公开了一种快速基因检测判 断酒量 的方法， 涉及 核酸检测技术领域， 包括以下步骤： 样本裂解： 将样本加入到裂解液中， 充分混合得 到裂解样本； 取试剂A加入到qPCR反应 管中， 加入 裂解样本， 混匀； 扩增： 所得qPCR反应管放入qPCR 设备中按照PCR程序进行反应； 在qPCR仪器上收 集检测结果， 得到样本的基因数据， 将所得基因 数据格式化， 将格式化后的数据输入事先构建的 酒量判断模型， 得出基因检测判断酒量结论； PCR 扩增体系中包括与酒量相关目标基因的引物。 本 发明基于快速基因检测方法和事先构建的酒量 判断模型， 能够在极短时间内完成基因检测判断 酒量， 为该技 术商业服务应用奠定 了基础。 权利要求书1页 说明书14页 附图10页 CN 114908146 A 2022.08.16 CN 114908146 A 1.一种快速基因检测判断酒量的方法， 其特 征在于： 包括以下步骤： S1、 样本裂解： 将 样本加入到裂解液中， 充分 混合得到裂解样本； S2、 取试剂A加入到qPCR反应管中， 取裂解样本加入到qPCR反应管中， 混匀； S3、 扩增： 所 得qPCR反应管放入qPCR设备中按照PCR程序进行反应； S4、 在qPCR仪器上收集检测结果， 得到样本的基因数据， 根据基因数据与酒量之间的对 应关系判断样本酒量； PCR扩增体系中包括与酒量相关目标基因的引物。 2.根据权利要求1所述的快速基因检测判断酒量的方法， 其特征在于： S4所述根据基因 数据与酒量之 间的对应 关系判断样本酒量， 具体包括： 将所得基因数据格式化， 将 格式化后 的数据输入 事先构建的酒量判断模型， 得 出基因检测判断酒量结论； 所述酒量判断模型的构建方法包括： S01、 获取样本的饮酒能力与饮酒量的关系， 建立数据库； S02、 获取样本的基因数据并进行基因数据格式化； S03、 根据格式化后的样本的基因数据和所述数据库， 选用机器学习模型， 构建基于样 本基因数据判断饮酒量的饮酒量判断模型。 3.根据权利要求2所述的快速基因检测判断酒量的方法， 其特征在于： S02所述获取样 本的基因数据的方法包括： S021、 样本裂解： 将 样本加入到裂解液中， 充分 混合得到裂解样本； S022、 取试剂A加入到qPCR反应管中， 取裂解样本加入到qPCR反应管中， 混匀； S023、 扩增： 所 得qPCR反应管放入qPCR设备中按照PCR程序进行反应； S024、 在qPCR仪器上收集检测结果， 得到样本的基因数据； PCR扩增体系中包括与酒量相关目标基因的引物； 其中， S021、 S022、 S023、 S024种各步 骤具体试剂和参数与S1 ‑S4中对应名称的步骤、 对应名称的试剂和对应参数相同。 4.根据权利要求1所述的快速基因检测判断酒量的方法， 其特征在于： 所述与酒量相关 目标基因包括rs12 29984基因位 点和rs671基因位 点。 5.根据权利要求1或3所述的快速基因检测判断酒量的方法， 其特征在于： 所述试剂A包 括Taq DNA Polymerase、 Tris ‑HCl、 MgSO4、 dNTP。 6.根据权利要求5所述的快速基因检测判断酒量的方法， 其特征在于： 所述试剂A中各 组分用量或浓度为： Taq  DNA Polymerase： 0.5 ‑1.5U； Tris ‑HCl： 30‑50mM； MgSO4： 2.6‑ 3.1mM； dNTP :0.05‑0.4mM。 7.根据权利要求1或3所述的快速基因检测判断酒量的方法， 其特征在于： 所述试剂A包 括Taq DNA Polymerase、 Tris ‑HCl、 KCl、 MgSO4、 dNTP、 BSA。 8.根据权利要求7所述的快速基因检测判断酒量的方法， 其特征在于： 所述试剂A中各 组分用量或浓度为： Taq  DNA Polymerase： 0.5 ‑1.5U； Tris ‑HCl： 30‑50mM； KCl： 100 ‑120mM； MgSO4： 2.6‑3.1mM； dNTP :0.05‑0.4mM； BSA:0.1mg/ml ‑2mg/ml。 9.根据权利要求1或3所述的快速基因检测判断酒量的方法， 其特征在于： 所述裂解液， 包括： SDS、 三羟甲基氨基甲烷、 DTC 。 10.根据权利要求9所述的快速基因检测判断酒量的方法， 其特征在于： 所述裂解液各 组分浓度为： S DS： 0.4％‑1％wt； 三羟甲基氨基甲烷： 0.3 M‑0.5M； DTC： 30mM‑100mM。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114908146 A 2一种快速 基因检测判断酒量的方 法 技术领域 [0001]本发明涉及核酸检测技 术领域， 具体涉及一种快速基因检测判断酒量的方法。 背景技术 [0002]酒是人类生活中的主要饮料之一。 中国制酒历史源远流长， 品种繁多， 名酒荟萃， 享誉中外。 黄酒是世界上最古老的酒类之一， 约在三千多年前， 商周时代， 中国人独创酒曲 复式发酵法， 开始大量酿制黄酒。 酒渗透于整个中华五千年的文明史中， 从文学艺术创作、 文化娱乐到饮食烹饪、 养生保健 等各方面在中国人生活中都占有重要的位置 。 [0003]但是我们知道， 饮酒过量往往会造成健康风险和意外伤害， 因此， 了解个人酒量， 未雨绸缪， 在酒文化盛行的中国就变得很 重要。 [0004]在人体当中， ADH1B和ALDH2这两个基因就是决定我们酒量的密码。 ADH1B和ALDH2 两个基因在人体中负责掌控酶的分解数量， 也就是决定着机体中乙醇转化为乙醛、 乙醛转 化为乙酸的速度。 乙醇如果分解不够快， 会进入血液， 会影响到我们的大脑， 这也就是喝酒 后头晕、 头疼的原因； 而乙醛如果分解不够快， 会让人反胃、 呕吐， 也是喝酒脸红的原因， 更 严重的是， 乙醛会杀死我们的肝脏细胞， 如果长期被乙醛刺激， 就容易导致肝硬化甚至肝 癌。 所以， 一个人的酒量到底好不好， 换成生物学的角度来看， 就是乙醇转化为乙醛、 乙醛转 化为乙酸的速度够不够快。 亚洲人ADH1B基因和ALDH2基因的突变率很高， 且同一个体二者 未必会同时突变， 因此， 不同个体之间的酒量差异是相当大的。 我们通过核酸检测这两个基 因的突变型， 可以在基因层面判断一个人的潜在酒量。 [0005]核酸检测的物质是样本中携带的遗传物质， 目前核酸检测被应用于多种遗传病的 诊断以及判断样本是否被某种带有可被特异识别遗传物质的病毒感染。 另外一种比较新的 应用领域， 是利用核酸检测， 来确定被检测个体的某种特征或能力等。 无论是商用还是医 用， 都需要 核酸检测在较短的时间内检测完成得 出结果。 [0006]传统的核酸检测方法， 如芯片检测、 D NA测序等， 需要在中心实验室中进行， 且需按 照严格的实验步骤， 耗时一般都超 过12小时， 有的甚至一周时间； 而常规的qP CR技术也需要 2小时左右才 能完成检测， 且需对样本进行DNA抽提、 离心、 震荡等步骤(这些步骤须借助额 外的专用设备， 如离心机等)。 由于目前全球形势的紧迫性， 人们对快速核酸检测关注度逐 渐增加， 也开发出了一些短时间内完成检测的方法， 如环介导等温扩增(LAMP)技术等， 但目 前的核酸检测 技术普遍存在以下问题中的部分或全部： 一是检测时间长： 测序或芯片测序 需要12小时 ‑1周的时间不等； 常规的qP CR需要2小时左右； 二是上述恒温扩增技术存在以下 问题： 1)准确率低， 平均在8 0％左右， 这样的准确率虽然对于普通性质的商业检测没有致命 影响， 但一旦用于传染病学检测， 其误差就是无法容忍的； 2)分辨率低， 很难做到单碱基分 辨率， 一般在10b p以上； 三是操作环 境要求高： 常规的测序和qP CR， 由于需要对样 本抽提、 离 心、 纯化等步骤， 需要在qP CR实验室中进 行， 且需接触相关的设备操作； 四是人员要求高： 由 于在严苛的环境下操作， 所以对操作人员有资质要求。 [0007]也就是说， 现有技 术中， 并不存在一种真正快速准确的核酸检测方法。说　明　书 1/14 页 3 CN 114908146 A 3