(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210819140.6 (22)申请日 2022.07.12 (71)申请人 吉林省水产科 学研究院 （吉林省渔 业生态环境及水产品质量 监督检测 中心） 地址 130033 吉林省长 春市二道区昆山路 1195号 (72)发明人 韩叶　刘慧吉　陈伟强　柳鹏　 李秀颖　闫春梅　郑伟　马驰　 陈婵娟　李冠颖　 (74)专利代理 机构 青岛海昊知识产权事务所有 限公司 37201 专利代理师 刘艳青 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01)C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种大麻哈鱼放 流效果的评估方法 (57)摘要 本发明公开了一种大麻哈鱼放流效果的评 估方法， 该方法包括： 采集大麻哈鱼样本： 包括放 流大麻哈鱼和洄游大麻哈鱼样 本； 筛选微卫星 标 记位点； 提取放流和洄游大麻哈鱼样本的DNA， 确 定微卫星位点基因分型； 洄游来源归属判定： 以 最大似然值法对放流大麻哈鱼和洄游大麻哈鱼 基因型进行比对， 将基因型完全匹配的洄游个体 判定为放流的大麻哈鱼； 放流效果评估： 对鉴定 为放流的大麻哈鱼做好标记， 计算其占回捕大麻 哈鱼的比例， 即增殖放流回捕率=标记 个体数/回 捕总个数。 经实际验证， 本发明能够准确追溯大 麻哈鱼洄游 来源， 为大麻哈鱼增殖放流效果评估 提供了绿色新方法。 通过此 发明填补了大麻哈鱼 增殖放流效果评估方面的空白。 权利要求书2页 说明书5页 附图1页 CN 115141892 A 2022.10.04 CN 115141892 A 1.一种大 麻哈鱼放 流效果的评估方法， 其特 征在于， 该 方法包括以下步骤： (1)采集大 麻哈鱼样本： 包括 放流大麻哈鱼和洄游大 麻哈鱼样本； (2)筛选微卫星标记位 点； (3)提取放 流和洄游大 麻哈鱼样本的DNA， 确定微 卫星位点基因分型； (3)洄游来源归属判定： 以最大似然值法对放流大麻哈鱼和洄游大麻哈鱼基因型进行 比对， 将基因型完全匹配的洄游个 体判定为 放流的大麻哈鱼； (4)放流效果评估： 对鉴定为放流的大麻哈鱼做好标记， 计算其占回捕大麻哈鱼的比 例， 即增殖放 流回捕率 ＝标记个 体数/回捕总个数。 2.如权利 要求1所述的评估方法， 其特征在于， 所述步骤(1)中， 每年10 ‑11月， 在吉林省 珲春市图们 江河口采集洄游大麻哈鱼； 用消毒剪子或镊子采集大麻哈鱼鱼鳞或鱼鳍组织； 组织样品放置 于95％乙醇溶 液中， 4℃保存备用。 3.如权利要求1所述的评估方法， 其特 征在于， 所述 步骤(2)中， 微 卫星标记位 点如下： 权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115141892 A 24.如权利要求1所述的评估方法， 其特征在于， 所述步骤(3)中， 确定微卫星位点基因分 型具体为： 利用样品的DNA， 取PCR产物， 进行电泳检测， 扩增反应成功后， 根据上述筛选结 果， 对引物进行荧光标记， 合成带FAM荧光标记的引物对， 对样品进行毛细管电泳分离和激 光诱导荧光检测； 将PCR产物置于全自动基因测序仪上进行SSR多态性分析， 该系统采用荧 光标记、 毛细管电泳 分离和激光诱导荧光检测技术； 再通过检测荧光标记， 所得数据被自动 收集， 利用分析软件自动统计 分析数据， 得出等位基因片段和峰高峰面积， 然后再计算出等 位基因频率、 观测杂合度、 期待杂合度、 多态信息含量的相关遗传学参数， 最终确定微卫星 位点基因分型。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115141892 A 3