(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211021524.X (22)申请日 2022.08.24 (71)申请人 中新国际联合研究院 地址 510700 广东省广州市黄埔区中新智 慧一街7号A-1栋 (72)发明人 任娇艳　肖淦泓　钟俊　 (74)专利代理 机构 广州粤高专利商标代理有限 公司 44102 专利代理师 江裕强 (51)Int.Cl. C07K 5/078(2006.01) C12N 15/11(2006.01) C07K 1/00(2006.01) C12P 21/02(2006.01) A61K 38/05(2006.01)A61P 19/06(2006.01) A23L 33/18(2016.01) (54)发明名称 一种具有降尿酸活性的二肽及其编码基因 与应用 (57)摘要 本发明公开了一种具有降尿酸活性的二肽 及其编码基因与应用。 本发明的具有黄嘌呤氧化 酶抑制活性的二肽名称为HH， 氨基酸序列为： His‑His， 其中， Hi s为组氨酸残基。 经体外黄嘌呤 氧化酶抑制活性实验及高尿酸秀丽隐杆线虫模 型证明， 本发 明的二肽具有显著 体外抑制黄嘌 呤 氧化酶活性， 从而有效抑制机体产生尿酸， 可广 泛应用于制备降尿酸食品或药物， 能有效治疗及 预防高尿酸血症， 并缓解痛风症状， 具有良好社 会经济效益。 权利要求书1页 说明书9页 附图6页 CN 115536729 A 2022.12.30 CN 115536729 A 1.一种具有降尿酸活性的二肽， 其特征在于， 所述二肽名称为HH， 氨基酸序列为His ‑ His， 其中， His为组氨酸残基。 2.根据权利要求1所述的一种具有降尿酸活性的二肽， 其特征在于， 所述具有降尿酸活 性的二肽的制备 方法包括 化学合成法、 酶解法或基因工程法。 3.根据权利要求1所述的一种具有降尿酸活性的二肽， 其特征在于， 所述具有降尿酸活 性的二肽的筛选方法为基于四个维度包括黄嘌呤氧化酶结合稳定性、 多肽分子物理特征、 多肽分子结构相似性及分子间作用力 分析， 对含D/L构型 的潜在抑制 黄嘌呤氧化酶活性多 肽进行高通 量虚拟筛 选， 最终得到目标多肽序列。 4.根据权利要求1所述的一种具有降尿酸活性的二肽， 其特征在于， 所述具有降尿酸活 性的二肽的体内降尿酸活性功能验证方法为基于高尿酸秀丽隐杆线虫模型， 比较单位线 虫 产生尿酸浓度的高低， 从而验证该二肽的体内降尿酸功能。 5.权利要求1所述的具有降尿酸活性的二肽的编码基因， 其特征在于， 所述编码基因的 碱基序列为CAC CAC、 CAUCAC、 CAC CAU或CAUCAU， 基因长度为6个碱基； 其中， CAC或CAU为组氨酸的密码子 。 6.权利要求1所述的一种具有降尿酸活性的二肽的应用， 其特征在于， 所述一种具有降 尿酸活性的二肽在制备预防或治疗高尿酸血症的功能性食品或药物， 或者在制备缓解痛风 症状的食品或药物中的应用。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述食品或药物的制备方法， 包括以下步 骤： 将权利要求1所述一种具有降尿酸活性的二肽与食品基质匀浆混合， 并加入辅料混匀， 而后借助喷雾 干燥制得粉剂， 制备 得到含有具有降尿酸活性 二肽的食品或药物。 8.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述功能性食 品的剂型包括乳剂、 片剂、 胶 囊剂、 颗粒剂、 粉剂、 软糖、 糖浆剂或口服液。 9.权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述药物 的剂型包括片剂、 胶囊剂、 颗粒剂、 丸 剂、 膏剂、 散剂、 糖浆剂或口服液。 10.根据权利要求6 ‑9所述的应用， 其特征在于， 所述药物采用涂抹、 贴敷或微针刺穿的 方式从皮肤 递送。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115536729 A 2一种具有降尿酸活性的二肽及其编码基因与应用 技术领域 [0001]本发明属于多肽技术领域， 具体涉及一种具有降尿酸活性的二肽及其编码基因与 应用。 背景技术 [0002]高尿酸血症属于代谢疾病， 主要诱因包括尿酸生成过多及尿酸排泄受阻， 当血清 尿酸浓度过高时， 易产生尿酸盐结晶沉积于 关节处， 引起痛 风症状。 目前三种常见降尿酸药 物的作用机制及对应药物分别为： 1)抑制尿酸生成， 主要为别嘌呤醇、 非布司他等； 2)促进 尿酸排泄， 主要为丙磺舒、 苯溴马隆等； 3)分解尿酸， 该类药是酶类物质， 如尿酸 酶。 然而， 上 述药物存在不同程度的副作用， 轻者出现恶心、 皮疹等不良反应， 重者引起肾脏损伤、 肝脏 炎症等。 因此找寻 一种安全、 有效的化 合物至关重要。 [0003]多肽作为目前功能活性成分研究中重要的原料之一， 具有丰富的生理活性， 如抗 氧化性、 抗菌性、 抗炎症活性等， 且其具有易吸收、 无毒或低毒性等优点。 而多肽的降尿酸活 性， 尤其是黄嘌呤氧化酶抑制活性， 逐渐成为世界范围内的研 究热点。 Weiwei  He等人在氧 嗪酸钾诱导的高尿酸血症大鼠中证实了金枪鱼肉水解物具有体内降尿酸活性， 分离纯化并 鉴定出一条具有抑制黄 嘌呤氧化酶活性的二肽FH， 其IC50为25.7mM(别嘌呤醇IC50为22.0 μ M)， 经氧嗪酸钾诱导的高尿酸大鼠模型评价FH具有体内降尿酸活性； Qingyong  Li等人对核 桃粉进行酶解， 鉴定得到七种黄嘌呤氧化酶抑制肽WDD、 HCPF、 WDQW、 PPKNW、 WPPKN、 ADIYTE和 WSREEQE， 相应IC50分别为2.41mM、 15.07mM、 0.95mM、 2.21mM、 2.06mM、 7.37mM和1.88mM(别嘌 呤醇IC50为5.71μM)， 并从结构上分析得出质子供体氨基酸残基含量越高， 多肽的黄嘌呤氧 化酶抑制活性越高， 而组氨 酸(His)的侧链平衡解离 常数约为7.0， 既可作为质子供体， 又可 作为质子受体。 因此， 含有His的多肽可能具有潜在黄嘌呤氧化酶抑制活性。 [0004]目前， 获得降尿酸活性肽的研究思路主要通过食源性蛋白经酶解、 纯化， 并鉴别黄 嘌呤氧化酶抑制活性较高的组分， 而后质谱解析该组分中多肽序列， 这种 方法通常具有盲 目性， 且耗时费力， 仅 从常见的食物蛋白入手， 缺 乏广泛性。 而鲜有报道从批量虚拟筛选入 手， 从所有可能的二肽、 三肽序列或更长多肽序列中筛选出具有潜在黄嘌呤氧化酶抑制活 性的多肽序列， 再通过人工合成或生物工程方法获得目标序列多肽 并进行功 能验证。 此研 究思路能更全面、 更快速、 更高效地找到目标多肽序列， 并可结合蛋白数据库(如NCBI等)， 借助BLAST技术找到含有目标肽段的食源性蛋白， 采用模拟酶切得到目标多肽， 或采用固相 合成及微生物发酵的方法获得目标多肽。 此外， 此研究思路在应用于制备预防或治疗高尿 酸血症的食品或药物， 或者应用于制备缓解痛风症状的食品或药物具有十 分广阔的发展 前 景。 [0005]现有文献报道了多肽FH， 具有黄嘌呤氧化酶抑制活性， 但其IC50为25.7mM(别嘌呤 醇IC50为22.0μM)， 表明黄嘌呤氧化酶抑制活性较弱(He  W,Su G,Sun‑Waterhouse  D,et  al.In vivo anti‑hyperuricemic  and xanthine  oxidase inhibitory  properties  of  tuna protein hydrolysates  and its isolated  fractions[J].Food  Chemistry,2019,说　明　书 1/9 页 3 CN 115536729 A 3