(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210875336.7 (22)申请日 2022.07.22 (71)申请人 北京阅微基因技 术股份有限公司 地址 100037 北京市海淀区三里河路39号 院10号楼6F (72)发明人 张奇　徐朝阳　胡欢　陈初光　 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种NOTCH2NLC基因CGG重复数检测体系及 试剂盒 (57)摘要 本申请属于分子诊断技术领域， 具体涉及一 种对神经元核内包涵体病相关NOTCH2NLC基因 CGG单元重复数量检测的体系及其试剂盒， 该体 系能够根据检测得到的全长产物大小和CGG重复 单元扩增产物片段大小的结果对CGG重复单元数 量作出准确的判断， 从而更加特异、 灵敏、 稳定、 快速的鉴定神经元核内包涵体病(NIID)， 并 区别 于其他相关神经性疾病。 权利要求书2页 说明书12页 附图8页 CN 115029434 A 2022.09.09 CN 115029434 A 1.一种用于扩增检测NOTCH2NLC基因5'非翻 译区域CGG重 复区域的CGG重复数的引物组 合， 其特征在于， 所述的引物组合包 含如下引物： 1)上/下游引物： 与NOTC H2NLC基因CG G单元重复区域上 下游序列特异性结合； 2)重复引物： 与NOTCH2NLC基因5 ’端3‑5个“CGG”重复基因以及 4‑7bp的重复区域边 界序 列互补， 同时引物5 ’端连接通用引物序列； 3)通用引物： 非人源化序列， 交叉测试不干扰反应 体系的扩增。 2.权利要求1所述的引物组合， 其特 征在于， 1)所述上/下游引物， 序列如SEQ  ID NO.5‑13任一所示； 2)所述重复引物， 序列如SEQ  ID NO.15‑26任一所示； 3)所述通用引物， 序列如SEQ  ID NO.27‑28任一所示； 优选的， 1)所述上/下游引物仅为下游引物， 序列如SEQ  ID NO.11‑13任一所示； 2)所述重复引物， 序列如SEQ  ID NO.18、 21、 25、 26任一所示； 3)所述通用引物， 序列如SEQ  ID NO.27、 28任一所示。 3.权利要求2所述的引物组合， 其特 征在于， 所述引物组合具体为： 所述1)上/下游引物为下游引物， 序列如SEQ  ID NO.12所示； 所述2)重复引物： 序列如SEQ  ID NO.18或21任一所示； 所述3)通用引物： 序列如SEQ  ID NO.27所示； 或， 所述1)上/下游引物为下游引物， 序列如SEQ  ID NO.12所示； 所述2)重复引物： 序列如SEQ  ID NO.25或26任一所示； 所述3)通用引物： 序列如SEQ  ID NO.28所示。 4.权利要求3所述的引物组合， 其特征在于， 所述引物组合 中， 还包含位于NOTCH2NLC基 因5'非翻译区域CGG重复区域5 ’端的上游引物和3 ’端的下游引物的全长引物组合， 所述全 长引物序列包括： 全长上游引物， 序列如SEQ  ID NO.4所示， 全长下游引物， 序列如SEQ  ID NO.11‑13所示； 优选的： 全长上游引物， 序列如SEQ  ID NO.4所示， 全长下游引物， 序列如SEQ  ID NO.12所示。 5.根据权利要求1 ‑4任一所述的引物组合， 其特征在于， 所述下游引物进一步包括荧光 基团修饰和/或硫代磷酸 化修饰。 6.一种扩增检测NOTCH2NLC基因5'非翻 译区域CGG重复区域的CGG重 复数的检测体系或 试剂盒， 其特 征在于， 包 含权利要求1 ‑5任一所述的引物组合。 7.权利要求6所述的检测体系或试剂盒， 其特征在于， 还包含酶混合液、 PCR扩增缓冲 液、 内标、 无核酸酶纯 水和质控品DNA。 8.权利要求1 ‑5任一所述引物组合在制备扩增检测NOTCH2NLC基因5'非翻 译区域CGG重 复区域的CG G重复数的检测体系或检测试剂盒中的应用。 9.根据权利要求8所述的应用， 其特征在于， 所述检测体系或检测试剂 盒中结果计算采权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115029434 A 2用公式如下： 全长体系： 重复体系： 其中， FLsize是标注的全长峰的大小， RPsize是标注的重复峰的大小， RP1st是重复体系第 一根峰的片段 大小。 10.一种扩增检测NOTCH2NLC基因5'非翻 译区域(UTR)CGG重复区域的CGG重复数的检测 方法， 其特征在于， 包含利用权利要求 1‑5任一所述引物组合， 或权利要求6 ‑7任一所述试剂 盒进行扩增检测的步骤； 优选的， 通过如下公式计算重复数： 全长体系： 重复体系： 其中， FLsize是标注的全长峰的大小， RPsize是标注的重复峰的大小， RP1st是重复体系第 一根峰的片段 大小。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115029434 A 3