(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210699861.8 (22)申请日 2022.06.20 (71)申请人 宁夏医科大学 地址 750004 宁夏回族自治区银川市胜利 街1160号 (72)发明人 马胜超　揭育祯　米英　高源　 杨慧霞　张正皓　丁宁　张晴　 姜怡邓　 (74)专利代理 机构 西安铭泽知识产权代理事务 所(普通合伙) 61223 专利代理师 崔瑞迎 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01) C12N 15/11(2006.01)A61K 45/00(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61P 9/00(2006.01) A61P 9/10(2006.01) (54)发明名称 一种lncRNA、 其检测试剂和抑制剂的应用 (57)摘要 本发明涉及缺血性心脏病的预防和治疗， 具 体涉及一种lncRNA、 其检测试剂和抑制剂的应 用。 所述lncRNA为lncMSTRG.7803.1， 其序列如 S E Q I D N O . 1 所 示 。本 发 明 证 明 了 lncMSTRG.7803.1在H/R作用下的衰老心肌细胞 中表达上调， 而HPo stC处理降低了衰老心 肌组织 和心肌细胞中lncMSTRG.7803.1的表达； 同时研 究得出lncMSTRG.7803.1能够促进H/R诱导 的衰 老心肌细胞自噬， 从而减弱IPostC对I/R损伤的 保护作用， 导致心脏损伤加重。 由此可见 lncMSTRG.7803.1作为大鼠心 肌中调控衰老心肌 细胞自噬的关键靶标， 能够显著促进衰老心肌细 胞自噬的改变， 可作为一种用于心肌梗死临床风 险评估的长链非编码RNA及其应用， 具有较好的 可行性及推广性， 为IHD等疾病的药物研究提供 新靶点。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图4页 CN 114941027 A 2022.08.26 CN 114941027 A 1.一种lncRNA表达水平的检测试剂在制备诊断和/或预后缺血性心脏病的产品中的应 用， 其特征在于， 所述 lncRNA为lncMSTRG.780 3.1， 其序列如SEQ  ID NO.1所示。 2.根据权利 要求1所述的应用， 其特征在于， 所述lncRNA在缺血性心脏病患者中表达上 调。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于， 所述试剂包括qRT ‑PCR检测用试剂。 4.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述qRT ‑PCR检测用试剂包括扩增所述 lncRNA的引物， 其序列如SEQ  ID NO.2‑3所示。 5.权利要求1中所述lncRNA的应用， 其特征在于， 用于筛选治疗缺血性心脏病的潜在物 质。 6.根据权利 要求5所述的应用， 其特征在于， 所述物质为下调所述lncRNA表达水平的物 质。 7.权利要求1中所述lncRNA的抑制剂的应用， 其特征在于， 用于制备治疗缺血性心脏病 的药物。 8.根据权利 要求7所述的应用， 其特征在于， 所述抑制剂包括能够靶向干扰所述lncRNA 的siRNA。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114941027 A 2一种lncRNA、 其检测试剂 和抑制剂的应用 技术领域 [0001]本发明涉及缺血性心脏病的预防和治疗一种lncRNA、 其检测试剂和抑制剂的应 用。 背景技术 [0002]缺血性心脏病(IHD)是一种由炎症、 离子通道损伤等多种因素导致冠状动脉梗阻 或狭窄引起的冠脉血流与心肌能量状态失衡的临床综合征。 动脉粥样硬化为IHD最常见病 因之一。 目前， IHD的发病率及总体死亡率呈逐年上升趋势， 给患者带来了极大的健康危害 和经济负担， 已成为严重的公共卫生问题。 缺血再灌注(I/R)损伤诱导的IHD引起不可逆的 心肌细胞死亡和心肌功能障碍， 是老年患者 发病和死亡的主要原因。 考虑到I/R损伤对人体 健康的负面影 响， 人们已努力阐明其潜在机制， 以改善心功能。 心肌缺血后处理(IPostC)是 一种内源性心肌保护 现象， 以多次心肌缺血和再灌注短循环保护心脏免受长期缺血， 从而 减少再灌注损伤。 近来研究表明， 缺血再灌注后会导致患者出现心律 失常、 心肌梗死面积扩 大、 心功能低下等更严重的损伤， 甚至死亡， 是心血管疾病临床治疗中的障碍。 衰老是机体 代谢的必然阶段， 在组织、 细胞甚至分子水平都会发生明显的变化。 大量临床前报告表明衰 老会增加心脏对I/R损伤的易感性和再灌注损伤的程度， 且有研究报道50％心梗病人和 80％因心梗死亡的病人年龄≥65岁， 随着年龄的增加死亡率急剧攀升， 预后差且缺乏有效 的的治疗手段。 [0003]自噬(Autop hagy)作为溶酶体介导的细胞内蛋白质和细胞器降解的一种新的死亡 方式， 是细胞清除受损和有害物质， 维持自身稳态的重要机制 。 在轻度缺血的情况下， 自噬 可能是一种适应性反应， 可保持心肌细胞活力， 限制梗死面积， 并减弱不利的左心室重构。 然而， 当缺血事件较严重或持续时间较长， 自噬过程可能被慢性激活， 导致细胞死亡增加。 研究表明， 自噬在急慢性缺血性心脏中普遍存在， 提示自噬对心肌组织的作用取决于诱导 程度和损伤时间。 Yang等的研究发现I/R诱导的心肌HL ‑1细胞自噬和凋亡明显减少， 提示自 噬在心肌I/R损伤反应中具有保护作用。 相反， Aoyagi等人的研究表明， 再灌注过程中过度 的自噬增加了细胞的死亡， 这对心脏是有害的。 在本研究中我们通过选用22 ‑24月龄SD 衰老 大鼠复制I/R及IPostC模 型， 细胞水平采用D ‑半乳糖诱导衰老心肌细胞模 型， 然后复制缺氧 复氧(H/R)损伤及缺氧后处理(HPostC)模型用来模拟动物水平的I/R及IPostC， 结果发现I/ R促进衰老心肌自噬发生， 而IPostC可抑制I/R诱导的自噬， 这与之前的报道一致。 此外， p62 的增加进一步说明自噬参与了IPostC对衰老心肌I/R损伤的保护作用， 但IPostC和HPostC 引起衰老心肌自噬水平降低的作用机制有 待进一步研究。 [0004]长链非编码RNA(long  noncoding  RNA， lncRNA)是在真核生物 中发现的一类长度 大于200个核苷 酸， 可转录基因DNA的5 ’ ‑非翻译区与靶基因组成复杂的调控而发挥作用。 最 新研究证实了lncRNA可通过多种机制参与细胞自噬调节， 并在衰老心肌IPO和衰老心肌细 胞HPostC中参与自噬的调控。 因此， 挖掘更多的与细胞自噬相关的lncRNA， 将有助于缺血性 心脏病的预防和治疗药物的开发。说　明　书 1/6 页 3 CN 114941027 A 3