(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210624029.1 (22)申请日 2022.06.02 (71)申请人 海南医学院 地址 571199 海南省海口市龙华区学院路3 号 申请人 广东医科 大学 (72)发明人 揭伟　申志华　郭峻莉　施凯佳　 邢敬慈　赵鋆　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 张梦泽 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12N 15/12(2006.01) C12N 15/11(2006.01) A61K 45/00(2006.01)A61K 48/00(2006.01) A61K 38/17(2006.01) A61P 9/00(2006.01) C12N 15/864(2006.01) (54)发明名称 RhoE基因在制备治疗糖尿病心肌病的药品 中的应用 (57)摘要 本发明提供了RhoE基因在制备治疗糖尿病 心肌病的药品中的应用， 属于生物医药技术领 域。 本发明首次发现糖尿病心肌病动物模型和体 外高糖培养的心肌细胞中RhoE表达 是下降的， 伴 随纤维化等的改变， 阐明了糖尿病/高糖刺激对 心肌细胞中RhoE表达具有显著 的抑制效应和促 纤维化作用， 且实验证实了高糖刺激通过A MPK信 号而下调了心 肌细胞中RhoE的表 达， 心肌细胞中 RhoE表达下调增加了纤维化。 通过靶向恢复心 肌 组织内RhoE的表达显著恢复了糖尿病导致的心 功能损伤。 权利要求书1页 说明书16页 序列表3页 附图9页 CN 115216528 A 2022.10.21 CN 115216528 A 1.检测RhoE基因和/或RhoE基因表达产物的试剂在制备辅助诊断糖尿病引起的心肌 纤 维化的产品中的应用； 所述RhoE基因的核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述RhoE基因在糖尿病引起的心肌纤维化 患者中表达下调。 3.一种检测RhoE基因表达量用于辅助诊断糖尿病引起的心肌纤维化的引物 组， 包括上 游引物和下游引物； 所述上游引物的核苷 酸序列如SEQ  ID NO.2所示， 所述下游引物的核苷 酸序列如SEQ  ID NO.3所示。 4.一种用于辅助诊断糖尿病引 起的心肌纤维化的试剂盒， 包括权利要求3所述的引物 组和PCR扩增用试剂。 5.促进RhoE基因表达的试剂在制备治疗糖尿病心肌病和/或减缓糖尿病引起的心肌纤 维化的药物中的应用； 所述RhoE基因的核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特 征在于， 所述药物的剂型包括注射剂。 7.一种治疗糖尿病心肌病和/或减缓糖尿病引起的心肌纤维化的重组腺相关病毒载 体， 所述重组腺相关病毒载体是将RhoE基因插入腺相关病毒载体中得到， 所述RhoE基因的 核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 8.根据权利要求7所述的重组腺相关病 毒载体， 其特征在于， 所述腺相关病 毒载体包括 AAV9病毒。 9.一种治疗糖尿病心肌病和/或减缓糖尿病引起的心肌纤维化的重组腺病毒， 由权利 要求7或8所述重组腺病毒表达载体转染包 装细胞得到。 10.一种治疗糖尿病心肌病和/或减缓糖尿病引起的心肌纤维化的药物， 包括权利要求 9所述的重组腺病毒。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115216528 A 2RhoE基因在制备治疗 糖尿病心肌病的药 品中的应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及RhoE基因在制备治疗糖尿病心肌病的药 品中的应用。 背景技术 [0002]糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。 当前全球糖尿病患病率增长迅速且 居高不下。 血糖持续控制不良情况会引起代谢紊乱及微血管病变， 进而引发心肌广泛灶性 坏死， 这种糖尿病引起的心脏并发症称为糖尿病心肌病(DCM)。 糖尿病心肌病会导致心力衰 竭、 心律失常及心源性休克， 重症患者甚至猝死。 因此， 加大对糖尿病性心肌病的防治研究 刻不容缓。 [0003]RhoE亦称Rnd3， 为Rho  GTP酶超家族的非典型性成员， 其 活性主要依赖于表达水平 及蛋白修饰的调节， 不同于经典Rho1、 Rho2等的GTP结合状态与GDP结合状态相互转化的调 节机制。 研究证实， RhoE为Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK1)的内源性抑制因子， 在细 胞骨架和极性维持、 细胞增殖、 细胞迁移、 细胞周期、 细胞凋亡以及细胞分化过程中发挥了 重要的作用[1‑3]。 [0004]目前， 还没有关于RhoE用于糖尿病心肌病的记载或报道。 [0005]参考文献 [0006]1.Jie W,Andrade  KC,Lin X,Yang X,Yue X,Chang J.Pathophysiological   Functions ofRnd3/RhoE.ComprPhysi ol.2015Dec  15,6(1):169 ‑86. [0007]2.Chardin  P.Function  and regulation  of Rnd proteins.N at Rev Mol Cell  Biol.2006,7(1):54 ‑62. [0008]3.Riento  K,Villalonga  P,Garg R,Ridley  A.Function  and regulation  of  RhoE.Biochem Soc Trans.20 05,33(Pt4):649 ‑51. 发明内容 [0009]有鉴于此， 本发明的目的在于提供RhoE基因在制备治疗糖尿病心肌病的药 品中的 应用。 [0010]本发明提供了检测RhoE基因和/或RhoE基因表达产物的试剂在制备辅助诊断糖尿 病引起的心肌纤维化的产品中的应用； 所述RhoE基因的核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示。 [0011]优选的， 所述RhoE基因在糖尿病引起的心肌纤维化患者中表达下调。 [0012]本发明还提供了一种检测RhoE基因表达量用于辅助诊断糖尿病引起的心肌纤维 化的引物组， 包括上游引物和下游引物； 所述上游引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO.2所示， 所述下游引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO.3所示。 [0013]本发明还提供了一种用于辅助诊断糖尿病引起的心肌纤维化的试剂盒， 包括上述 方案所述的引物组和PCR扩增用试剂。 [0014]本发明还提供了促进RhoE基因表达的试剂在制备治疗糖尿病心肌病和/或减 缓糖说　明　书 1/16 页 3 CN 115216528 A 3