(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210743728.8 (22)申请日 2022.06.28 (71)申请人 广西医科 大学 地址 530021 广西壮 族自治区南宁市双拥 路22号 (72)发明人 周素芳　马义丽　杨雪佳　 (74)专利代理 机构 北京东方盛凡知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11562 专利代理师 陈月霞 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 GPNMB基因作为无创生物标志物在制备诊断 肝纤维化和肝癌疾病产品中的应用 (57)摘要 本发明公开了GPNMB基因作为无创生物标志 物在制备诊断肝纤维化和肝癌疾病产品中的应 用， 属于生物医药技术领域。 所述应用具体以血 液为待测样本， 通过检测GPNMB基因表达量以诊 断疾病。 本发 明通过转录组测序肝损伤组织和血 液样本， 结合在线生物数据库对基因进行筛选， 定位核心基因。 再通过RT ‑qRCR实验验证临床患 者标本核心 基因表达情况， 结果显示， 基因GPNMB 在肝纤维化患者和肝癌患者血液中表达量均高 于正常人， 且在肝纤维化患者血液表达量高于肝 癌患者， 证明GPNMB基因有望成为同时诊断肝纤 维和肝癌的无创生物标志物， 为肝纤维化和肝癌 的早期防治提供新的诊断靶点。 权利要求书1页 说明书11页 序列表1页 附图6页 CN 114921559 A 2022.08.19 CN 114921559 A 1.GPNMB基因作为无创生物标志 物在制备诊断肝纤维化疾病产品中的应用。 2.GPNMB基因作为无创生物标志 物在制备诊断肝癌疾病产品中的应用。 3.根据权利要求1 ‑2任一项所述的应用， 其特征在于， 所述产品以血液为待测样本， 通 过检测GPNMB基因表达量以诊断疾病。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述产品包括检测GPNMB基因表达量的试 剂。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述试剂包括检测GPNMB基因表达量的引 物组， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.1‑2所示。 6.一种用于肝纤维化诊断的试剂盒， 其特 征在于， 包括检测GPNMB基因表达量的试剂。 7.一种用于肝癌诊断的试剂盒， 其特 征在于， 包括检测GPNMB基因表达量的试剂。 8.根据权利要求6 ‑7任一项所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂包括核苷酸序列如 SEQ ID NO.1‑2所示的引物组。 9.GPNMB基因作为无创生物标志物在制备同时诊断肝纤维化和肝癌疾病产品中的应 用。 10.一种用于诊断肝纤维化和肝癌的试剂盒， 其特征在于， 包括检测GPNMB基因表达量 的试剂。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114921559 A 2GPNMB基因作 为无创生物标志物在制备诊断肝纤维化和肝癌 疾病产品中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药技术领域， 特别是涉及一种GPNMB基因作为无创生物标志物 在制备诊断肝纤维化和肝癌疾病产品中的应用。 背景技术 [0002]在世界范围内， 原发性肝癌是癌症相关死亡的第四大常见原因， 在发病率方面排 名第六位， 其中肝细胞癌(Hepatocellular  Carcinoma， HCC)占原发性肝癌的绝大多数， 超 过了90％。 根据世界卫生组织年度预测， 估计到2030年， 将有100多万患者死于HCC。 目前， HCC治疗的方法包括手术切除、 经动脉化疗栓塞、 局部射频消融和 器官移植， 晚期不能手术 切除的HCC病例常规用多激酶抑制剂索拉非尼治疗， 但是， 以上的临床治疗方案对于中晚期 尤其是晚期肝细胞癌患者尚不能根治， 再加上大多数肝病患者中确诊HCC时已经处于中晚 期， 错过了最佳的治疗时机， 因此， H CC仍然是威胁全人类健康的一个重大问题。 [0003]已有的研究表明， 大约90％的HCC患者与肝硬化有 关。 无论哪种原因诱发的肝硬化 都是导致HCC发生的危险诱因， 其中酒精 性肝硬化仅占肝癌病例的15 ‑30％， HCC仍是肝硬化 患者死亡的主要原因。 慢性肝病患者持续的肝脏炎症和纤维化， 可导致肝硬化， 进一步形成 发育不良的结节， 即癌前病变， 结节内异常增生的细胞具有增殖、 侵袭和生存优势， 并最终 完成向HCC的转变。 [0004]肝纤维化是HCC风险的关键因素。 一方面， HCC患者存在晚期 肝纤维化， 可能会增加 抗肿瘤治疗并发症甚至死亡(由于肝功能衰竭)的风险； 另一方面， 肝纤维化是治疗后HCC复 发的危险因素。 因此， 检测和分期肝纤维化对于指导诊断HCC的患者的治疗至关重要。 疾病 早期控制肝纤维化对HCC的进展也 非常重要。 传统上肝纤维化的评估 是通过肝活检进 行的， 这是目前诊断的黄金标准， 一种有潜在并发症的侵入性手术， 如疼痛(20％)和出血 (0.5％)。 除潜在并发症外， 肝活检还受到抽样误差、 肝病病因和观察员内部和观察员之间 差异等诸多因素限制 。 由于肝活检的这些局限性， 许多非侵入性肝纤维化评估工具已经被 开发出来， 如基于成像技术测量肝脏硬度作为纤维化的替代指标， 包括基于超声和核磁共 振成像的方法。 然而， 考虑到成本和前期资金投资的要求， 这些成像方式的可用性仅限于某 些临床环境， 且这些非侵入诊断需要对照肝活检进行验证。 以实验室为基础的肝纤维化血 清学标志物检测由于操作简 便， 无创， 更为临床普遍接受与使用， 通过 受试者工作曲线下面 积来评估检测指标的敏感性和特异性， 目前使用最多的如： 转氨酶/血小板比率指数 (APRI)、 纤维化 ‑4评分(FIB ‑4)和γ‑谷氨酰转肽酶与血小板比率(GPR)等。 虽然基于血清生 物标志物的诊断更便宜且更容易被患者接受， 但迄今为止， 没有一个指标被认 为是标准的， 它们不能对纤维化等级分层、 预测能力有限并且可能导致假阳性错误， 仍然需要筛选更为 理想的肝纤维化血清生物标志 物。 [0005]当前， 临床上仍然缺乏能同时作为肝纤维化和肝癌发生的生物标记物， 因此， 迫切 需要寻找 新的生物标记物， 作为肝纤维化和HCC早期 筛查的标记物， 为肝细胞癌的早期防治说　明　书 1/11 页 3 CN 114921559 A 3