ICS 71.100.70 Y 42 中华人民共和国国家标准 GB/T35824—2018 染发类化妆品中20种禁限用染料 成分的测定 高效液相色谱法 Determination of 2o kinds of prohibited and restricted dyestuff in hair dyes- High performance liquid chromatography 2018-09-01实施 2018-02-06发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 35824—2018 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出 本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口。 本标准起草单位：北京市产品质量监督检验院、欧莱雅（中国）有限公司、上海市日用化学工业研 究所。 本标准主要起草人：卢晓蕊、沈虹、许海东、杜洪森、沈敏 GB/T35824—2018 引 本标准的被测物质邻苯二胺、间苯二胺是我国《化妆品安全技术规范》规定的禁用物质。 禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质。《化妆品安全技术规范》规 定：若技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时，应进行安全性风险评估，确保在正常、合理及可 预见的使用条件下不得对人体健康产生危害。 目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准的制定，仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法 Ⅱ GB/T35824—2018 染发类化妆品中20种禁限用染料 成分的测定高效液相色谱法 1范围 本标准适用于染发类化妆品中20种禁限用染料成分的测定。 本标准染料成分的检出限和定量限参见附录A的表A.1。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3方法提要 试样经溶剂提取后，采用高效液相色谱分离，二极管阵列检测器检测，外标法定量 4试剂与材料 除非另有说明，所用水为GB/T6682中规定的一级水。 4.1标准物质：20种禁限用染料成分的中文名称、INCI名称、CAS号、分子式、结构式、相对分子质量 参见附录B的表B.1。 4.2甲醇：色谱纯。 4.3乙醇：分析纯。 4.4 磷酸二氢钾：分析纯。 4.5 磷酸氢二钠：分析纯。 4.6亚硫酸氢钠：分析纯。 4.7亚硫酸氢钠水溶液（1g/L）：称取亚硫酸氢钠（4.6)1.00g（精确至0.01g）于容量瓶中，加水定容至 1 000 mL. 4.8乙醇水溶液：[乙醇十亚硫酸氢钠水溶液（4.7)］=1十1（体积比）。 4.90.05mol/L磷酸盐缓冲液溶液：准确称取磷酸二氢钾（4.4)6.8045g（精确至0.0001g）和磷酸氢 二钠（4.5）17.907g（精确至0.0001g）至容量瓶中，加水定容至1000mL。 4.10乙醇+0.05mol/L磷酸盐缓冲液=1+49（体积比）。 4.11乙醇十0.05mol/L磷酸盐缓冲液=1+1（体积比）。 4.12乙醇+0.05mol/L磷酸盐缓冲液=5+95（体积比）。 4.13标准储备溶液A：分别准确称取各标准物质（-苯二胺、0-苯二胺、m-苯二胺、力-氨基苯酚、m-氨 4-氯间苯二酚、羟苯并吗啉、邻氨基苯酚、6-氨基间甲酚、1-萘酚、1.5二羟基萘、2.7二羟基萘，共17种） 1 GB/T35824—2018 50mg（精确至0.1mg）于棕色容量瓶中，用乙醇水溶液（4.8）溶解后定容至10mL，配置成浓度为5mg/ mL的标准储备液，于4℃～6℃条件下避光保存，保存期为3天。 硫酸盐，共2种）50mg（精确至0.1mg）于棕色容量瓶中，用亚硫酸氢钠水溶液（4.7）溶解后定容至 10mL，配置成浓度为5mg/mL的标准储备液，于4℃～6℃条件下避光保存，保存期为3天 标准储备溶液C：准确称取标准物质（4-硝基-o-苯二胺，1种）25mg（精确至0.1mg）于棕色容量瓶 中，用乙醇水溶液（4.8）溶解后定容至10mL，配置成浓度为2.5mg/mL的标准储备液，于4℃~6℃条 件下避光保存，保存期为3天。 4.14混合标准中间液：混合标准中间液：准确移取A、B标准储备液各200μL，C标准储备液400μL 于10mL容量瓶中，用磷酸盐缓冲液溶液稀释至刻度，配置成各标准物质浓度均为100μg/mL的混合 标准溶液，需现用现配。 1μg/mL,5μg/mL,10μg/mL,20μg/mL,40μg/mL，80μg/mL，100μg/mL的系列标准混合溶液，需 现用现配。 5仪器和设备 5.1高效液相色谱-二极管阵列检测器。 5.2分析天平：感量0.1 mg。 5.3漩涡混合器。 5.4超声波清洗器 5.5离心机：转速不小于5000r/min。 6试样制备 本标准提供三个前处理方法，可根据需要自行选择合适的方法。 方法一：准确称取1.0g样品（精确至0.001g）于25mL具塞刻度塑料离心管中，首先加入10mL 甲醇（4.2）涡旋并超声10min，使样品分散并提取自标物，用甲醇（4.2）定容至25mL，涡旋混合均匀，超 声提取10min，然后于5000r/min离心10min。准确移取上层提取液5mL于5mL刻度塑料试管 至5mL，涡旋1min后，上清液经0.45μm滤膜过滤作为测定液，用高效液相色谱测定。 方法二：准确称取1.0g样品（精确至0.001g）于25mL具塞刻度塑料离心管中，加人乙醇十 0.05mol/L磷酸盐缓冲液=1十49（体积比）（4.10）的混合溶液定容至25mL，剧烈振荡使样品分散，涡 旋1min，超声15min，5000r/min离心10min，取上清液经0.45μm滤膜过滤作为测定液，用高效液 相色谱测定。 注：适合分离p-苯二胺、0-苯二胺、m-苯二胺、P-氨基苯酚、m-氨基苯酚、间苯二酚、4-氨基2-羟基甲苯、羟苯并吗 琳、邻氨基苯酚、6-氨基间甲酚、甲苯-2,5-二胺硫酸盐、N，N-双（2-羟乙基）-P-苯二胺硫酸盐、4-硝基-0-苯二胺 这13种染料。 方法三：准确称取1.0g样品（精确至0.001g）于25mL具塞刻度塑料离心管中，加人乙醇十 0.05mol/L磷酸盐缓冲液=1十1（体积比）（4.11）的混合溶液定容至25mL，剧烈振荡使样品分散，涡旋 1min，超声15min，5000r/min离心10min，取上清液经0.45μm滤膜过滤作为测定液，用高效液相色 谱测定。 注：适合分离2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、5-氨基-6-氯-0-甲酚、6-羟基吲哚、4-氯间苯二酚、1-萘酚、1,5二羟基萘、 2,7二羟基萘这7种染料。 2