ICS 65.120 B 46 GE 中华人民共和国国家标准 GB/T 23710—2009 饲料中甜菜碱的测定 离子色谱法 Determination of betaine in feeds- Ion chromatography 2009-06-12发布 2009-12-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T23710—2009 前言 本标准的附录A为资料性附录。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准负责起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中 心（北京）。 本标准参加起草单位：中国农业科学院饲料研究所。 本标准丰要起草人：闫惠文、索德成、张萍、刘庆牛， 1 GB/T23710—2009 饲料中甜菜碱的测定 离子色谱法 1范围 本标准规定了离子色谱法测定配合饲料、浓缩饲料、预混合饲料、饲料添加剂甜菜碱（或盐酸盐）和 复合甜菜碱中甜菜碱（或盐酸盐）的方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、预混合饲料、饲料添加剂甜菜碱（或盐酸盐）和复合甜菜碱中甜 菜碱（或盐酸盐）含量的测定。 本标准定量限为200mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准， GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 3原理 用水溶解或提取试样中的甜菜碱，溶液经过液-液萃取净化，将提取液稀释至合适的浓度后，使用阳 离子交换柱和非抑制型电导检测器分离测定 4采样 按GB/T14699.1执行。 5试样的制备 按GB/T20195制备样品。 6试剂和溶液 除非另有说明，在分析中仅使用优级纯或色谱纯试剂。 6.1水：符合GB/T6682一级用水的规定 6.2甲磺酸（纯度≥99%）。 6.3 三氯甲烷。 6.4流动相：1.5mmol/L.甲磺酸水溶液。 称取2.88g甲磺酸（精确至0.01g），用水定容至1000mL，该溶液浓度为30mmol/L。取50mL 该溶液，用水定容至1000mL(pH=2.8~3.0）。 6.5甜菜碱（或甜菜碱盐酸盐）标准品：纯度大于98%。 6.6甜菜碱标准储备液： 准确称取0.1000g于105℃干燥过的甜菜碱（或0.1312g于105℃干燥过的甜菜碱盐酸盐）标准 个月。 1 SAG GB/T23710—2009 6.7甜菜碱标准工作液： 准确吸取25.0mL、5.0mL、2.5mL、0.5mL甜菜碱标准储备液（6.6）于50mL容量瓶中，用水定 容。该标准工作液的浓度分别为：0.5mg/ml、0.1mg/mL、0.05mg/mL、0.01mg/mL。该溶液用时 现配。 7仪器设备 7.1振荡器（或超声波提取器）：水平方向振荡，频率250r/min～300r/min。 7.2离心机。 7.3离子色谱系统，由下述部件组成： 一泵（无脉冲）； 一电子电导检测器：适合阳离子测定； 分析柱：阳离子交换分离柱或性能相当的其他分析柱。 7.4电子天平：感量为0.0001g。 8分析步骤 8.1提取和净化 8.1.1饲料样品 称取浓缩饲料和预混合饲料试样2g、配合饲料试样5g，精确至0.0001g，置于100mL容量瓶中， 加人大约80mL水，混合后置于振荡器上剧烈振荡或超声提取30min，静置10min，定容，离心或过 滤。取2mL滤液于离心管中，加人2mL三氯甲烷，剧烈震摇后放置10min，5000r/min离心10min， 移取上层清液，过0.45μm滤膜后上机测定。 8.1.2甜菜碱（或盐酸盐）和复合甜菜碱样品 称取添加剂甜菜碱（或盐酸盐）试样0.1g、复合甜菜碱试样1g，精确至0.0001g，置于100mL容 量瓶中，加入大约80mL水，混合后置于振荡器上剧烈振荡或超声提取30min，静置10min，定容，离心 或过滤，滤液用水稀释至适当的浓度后过0.45μm滤膜，上机测定。 8.2测定 8.2.1色谱条件 流速:1.0 mL/min。 柱温：40℃。 进样量：10μL~20μL。 8.2.2测定 向离子色谱（IC)分析仪连续注人甜菜碱标准工作液，直至得到基线平稳，峰形对称且峰面积能够 重现的色谱峰。 依次注入标准、试样溶液，积分得到峰面积，用标准系列进行单点或多点校准。参见附录A。 9结果计算 试样中甜菜碱的含量X，以毫克每千克（mg/kg）表示，按式（1）计算： ..(1) m 式中： c一一由标准曲线查得的试样测定液中甜菜碱的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）； V一一定容体积，单位为毫升（mL）； m——试样质量，单位为克（g）。 2 GB/T23710—2009 试样中甜菜碱盐酸盐的含量Xz以毫克每千克（mg/kg）表示，按式（2）计算： ...（2) m 式中： c——由标准曲线查得的试样测定液中甜菜碱的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）； V一定容体积，单位为毫升（mL)； m试样质量，单位为克（g）； 1.3117一一由甜菜碱换算成甜菜碱盐酸盐的系数 每个试样取两份试料进行平行测定，以两次平行测定的算术平均值为测定结果，结果保留三位有效 数字。 10 重复性 两个平行试料测定值的相对偏差不大于5%。